| 人CYP27B1真核表达构建及其在293T细胞表达 |
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| 引用本文： | 尚书凤,王杨科,路宏朝,王琦,陈为,张琳.人CYP27B1真核表达构建及其在293T细胞表达[J].湖北农业科学,2016(13):3486-3489. |
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| 作者姓名： | 尚书凤 王杨科 路宏朝 王琦 陈为 张琳 |
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| 作者单位： | 1. 陕西理工学院生物科学与工程学院,陕西汉中,723000;2. 洛阳理工学院环境与化学学院,河南洛阳,471000 |
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| 基金项目： | 陕西理工学院人才启动项目(SLGQ13(2)-24) |
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| 摘 要： | CYP27B1是血清活性维生素D_3合成的关键酶,根据Gen Bank报道的序列设计特异引物,以Hep G2细胞的c DNA为模板,扩增CYP27B1的编码区,构建CYP27B1的真核表达载体,在293T细胞表达并检测其催化活性。结果表明,重组表达载体pc DNA-CYP27B1构建成功,pc DNA-CYP27B1及对照质粒pc DNA分别瞬时转染293T细胞。Western blot检测结果表明CYP27B1在293T成功表达。HPLC检测结果显示重组表达的CYP27B1能羟化25(OH)D_3生成1α,25(OH)_2D_3。
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| 关 键 词： | CYP27B1 真核表达载体 羟化 HPLC |
Constructing Expression Vector of Human CYP27B1 and Expression in 293T Cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CYP27B 1 eukaryotic expression vector hydrolysis HPLC |
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