| 鸡PLAM2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备 |
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| 引用本文： | 杨涵江,辛 颖,麻丽霞.鸡PLAM2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(11):48-52. |
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| 作者姓名： | 杨涵江 辛 颖 麻丽霞 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院;西北农林科技大学 动物科技学院;西北农林科技大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 陕西省“13115”科技创新重大专项（2009ZDKG-18） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-PLA2融合蛋白。将GST-PLA2融合蛋白免疫青年蛋鸡,每次0.3mg/只,共免疫4次,收集鸡蛋,提取卵黄抗体,采用West-ern Blotting检测抗体的特异性。【结果】成功克隆出了鸡PLA2基因,构建了pGEX-4T-1-PLA2原核表达载体,并诱导表达了分子质量为44.59ku的GST-PLA2融合蛋白。GST-PLA2融合蛋白免疫蛋鸡后获得了卵黄抗体,经West-ern Blotting检查,制备的卵黄抗体具有很好的特异性。【结论】构建了表达鸡PLA2基因的表达系统,并成功的制备了抗鸡PLA2的卵黄抗体。
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| 关 键 词： | 鸡 PLA2基因 原核表达 卵黄抗体 |
| 收稿时间： | 5/5/2011 12:00:00 AM |
Cloning and expression of chicken PLAM2 gene and preparation of hen egg yolk immunoglobulin against chicken PLA2 |
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| YANG Han-jiang,XIN Ying,MA Li-xia,ZHANG Zhi-ying.Cloning and expression of chicken PLAM2 gene and preparation of hen egg yolk immunoglobulin against chicken PLA2[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(11):48-52. |
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| Authors: | YANG Han-jiang XIN Ying MA Li-xia ZHANG Zhi-ying |
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| Institution: | (College of Animal Science & Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chicken PLAM2 gene prokaryotic expression hen egg yolk immunoglobulin |
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