| 牦牛IFN-β基因在毕赤酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 王生富,孙晓林,段凤云,何延华,闫鸿斌,景志忠.牦牛IFN-β基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].甘肃农业大学学报,2010,45(5). |
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| 作者姓名： | 王生富 孙晓林 段凤云 何延华 闫鸿斌 景志忠 |
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| 基金项目： | 国家高新技术"863"项目，国家支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 用真核表达引物从pGEM-yakIFN-β重组质粒中扩增出牦牛IFN-β基因,将目的基因和真核表达载体pPIC9K连接转入E.coli的JM109中,得到pPIC9K-yakIFN-β重组表达质粒.通过电击法将经SalⅠ线性化的pPIC9K-yakIFN-β质粒转化到巴斯德毕赤酵母GS115感受态细胞中,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,利用甲醇诱导表达,分泌表达产物用MTT法检测其生物学活性.经SDS-PAGE电泳分析表明:表达出约22ku大小分泌于胞外的牦牛IFN-β蛋白分子量,比理论值稍大;MTT结果表明:纯化的重组yak-IFN-β蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性.
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| 关 键 词： | 牦牛 IFN-β基因 巴斯德毕赤酵母 分泌表达 |
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