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山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建及表达
引用本文:谢芳,张强,颜新敏,吴国华,李健,朱海霞,郭爱疆,韩若婵,施程洪,鞠厚斌,朱彩珠,岳城,才学鹏.山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建及表达[J].新疆农业大学学报,2008,31(3):1-4.
作者姓名:谢芳  张强  颜新敏  吴国华  李健  朱海霞  郭爱疆  韩若婵  施程洪  鞠厚斌  朱彩珠  岳城  才学鹏
作者单位:1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052
2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046
3. 新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052
摘    要:从重组克隆载体pMD18-P32中扩增出山羊痘病毒P32基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-P32.重组质粒pPIC9K-P32用Sal I线性化后,与毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115混合后电转化,使重组表达载体与酵母染色体发生同源重组.采用G418抗性梯度筛选法得到高拷贝重组菌株,甲醇诱导目的基因表达.SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,用酵母成功表达出了31kD的重组蛋白,该蛋白具有生物学活性,能被山羊痘阳性血清识别.

关 键 词:山羊痘病毒  P32基因  毕赤酵母  诱导表达  山羊痘  病毒  基因真核表达载体  构建及表达  Virus  Gene  Recombinant  Antigen  Expression  识别  阳性血清  生物学活性  重组蛋白  结果  分析  基因表达  甲醇诱导  重组菌株  高拷贝  筛选  梯度

Construction and Expression of Recombinant Antigen P32 Gene of Goatpox Virus
XIE Fang,ZHANG Qiang,YAN Xin-min,WU Guo-hua,LI Jian,ZHU Hai-xia,GUO Ai-jiang,HAN Ruo-chan,SHI Cheng-hong,JU Hou-bin,ZHU Cai-zhu,YUE Cheng,CAI Xue-peng.Construction and Expression of Recombinant Antigen P32 Gene of Goatpox Virus[J].Journal of Xinjiang Agricultural University,2008,31(3):1-4.
Authors:XIE Fang  ZHANG Qiang  YAN Xin-min  WU Guo-hua  LI Jian  ZHU Hai-xia  GUO Ai-jiang  HAN Ruo-chan  SHI Cheng-hong  JU Hou-bin  ZHU Cai-zhu  YUE Cheng  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:
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