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干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库构建及EST序列分析
引用本文:罗海斌,曹辉庆,魏源文,邓智年,潘有强,郭元元,何海波,李杨瑞.干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库构建及EST序列分析[J].南方农业学报,2012,43(6):733-737.
作者姓名:罗海斌  曹辉庆  魏源文  邓智年  潘有强  郭元元  何海波  李杨瑞
作者单位:广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室;
基金项目:广西自然科学基金创新研究团队项目(2011GXNSFF018002);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻10100005-9);广西科学基金项目(桂科基0778006-6,桂科基0832026,2010GXNSFA013102);广西科学基金项目应用基础研究专项项目(桂科基0991021);广西农业科学院基本科研业务专项项目[200803Z(基),200902Z(基)];广西农业科学院科技发展基金项目(2007023);广西重点实验室建设项目(12-071-09)
摘    要:【目的】构建甘蔗根系全长cDNA文库,并进行测序,为分离克隆甘蔗抗旱候选基因奠定基础。【方法】在干旱胁迫条件下,以新台糖22号甘蔗根系为材料,采用SMART技术构建cDNA文库,并进行EST序列分析。【结果】文库构建质量鉴定结果显示,文库库容量为1.0×106 PFU/mL,重组率约95%,文库插入片段长度在 500~2000 bp,平均长度约1102.1 bp。挑选526个阳性克隆进行单向测序后,共获得 523个ESTs序列,去除载体、接头序列以及长度低于100 bp的序列后,进行聚类分析并组装,共得到468个Uni-ESTs,其中congtig 29个,singlets 439个,分别占总数的6.5%和93.5%。通过与NCBI非冗余蛋白库进行BLASTX比对,发现444个Uni-ESTs在GenBank有同源序列,占94.87%;获得24个未知蛋白功能基因,占5.13%。【结论】构建了干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库,获得523个ESTs序列和468个Uni-ESTs,并获得一批新的未知蛋白功能基因。

关 键 词:cDNA文库  甘蔗  根系  表达序列标签  测序
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