成年SD大鼠胃窦Cajal间质细胞分离、培养及鉴定 |
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作者姓名: | 张程程 彭艳 陈海交 杨建文 刘薇薇 刘丽 |
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作者单位: | 湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208,湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208,湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208,湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208,湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208,湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室, 湖南 长沙 410208 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81403487);湖南省教育厅青年基金(14B128)。 |
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摘 要: | 目的 探讨成年SD大鼠胃窦起搏细胞Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)的原代分离、培养及鉴定方法,为深入研究其生理功能提供条件。方法 8~9周龄SD成年大鼠,禁食24 h,乙醚吸入麻醉,颈椎脱臼处死。无菌条件下采用精细解剖方法快速取出胃窦平滑肌组织,将其剪成1~2 mm3小块后,使用Ⅱ型胶原酶消化法于37℃培养箱内消化60 min,离心后过200目筛,接种于DMEM/F12完全培养基(含5 ng/mL干细胞因子)中进行培养。用酪氨酸蛋白激酶受体c-kit特异性抗体免疫荧光染色鉴定细胞类型。结果 培养72 h后,于倒置显微镜下观察,可见细胞贴壁,呈不规则三角形、星形或梭形,有多个突起;随着培养时间的延长,各突起彼此相互连接形成网络;此原代培养细胞c-kit抗体免疫荧光染色呈阳性。结论 成功建立了一套由成年SD大鼠胃窦组织采用Ⅱ型胶原酶消化法原代培养ICC的方法,为ICC的生理功能、病理改变以及胃肠道生理与病理关系的研究奠定了基础。
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关 键 词: | 胃窦 Cajal间质细胞 细胞培养技术 |
收稿时间: | 2016/11/24 0:00:00 |
Isolation, Culture and Identification of Interstitial Cells of Cajal in Gastric Antrum of Adult Rats |
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Authors: | ZHANG Chengcheng PENG Yan CHEN Haijiao YANG Jianwen LIU Weiwei and LIU Li |
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Institution: | Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China,Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China,Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China,Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China,Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China and Key Acu-Moxibustion Laboratory of Biological Information Analysis, Institute of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | gastric antrum interstitial cells of Cajal cell culture techniques |
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