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| 春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化 | |
| 作者姓名： | 单丽丽 陆瑞菊 王亦菲 陆惠丽 黄剑华 |
| 作者单位： | [1]上海市农业科学院生物技术研究所,上海201106 [2]上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106 |
| 基金项目： | 上海市科技兴农科技攻关项目 |
| 摘 要： | 以春兰为研究材料，对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明，在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质，采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类，可以得到高质量春兰基因组DNA。电泳检测表明，所获得的DNA完整，无降解，完全可以满足R-APD等分子标记分析的需要。同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化，建立了适合春兰R-APD分子标记的最佳反应体系，即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶，60μmol／L dNTPs，2．25mmol／L Mg^2＋，1．0μmol／L引物，1．5ng／μl模板DNA。 |
| 关 键 词： | 春兰 RAPD DNA 反应体系 春兰 基因组 提取液 RAPD 反应体系 优化 Cymbidium System Reaction Optimization Genomic DNA 模板 聚合酶 最佳 分子标记 影响因素 标记分析 完全 降解 电泳检测 |
Extraction of Genomic DNA and Optimization of RAPD Reaction System of Cymbidium goeringii |
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| Authors: | Shan Lili Lu Ruiju Wang Yifei Lu Huili Huang Jianhua |
| Abstract: | |
| Keywords: | Cymbidium goeringii RAPD DNA reaction system |
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