蓖麻RAPD-PCR反应体系的正交优化 |
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作者姓名: | 陈永胜 郝卫国 朱国立 李金琴 |
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作者单位: | 陈永胜(内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽,028000);郝卫国(内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽,028000);朱国立(内蒙古通辽市农科院,内蒙古通辽,028015);李金琴(内蒙古通辽市农科院,内蒙古通辽,028015) |
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摘 要: | 以东北蓖麻为材料建立蓖麻RAPD反应优化体系,用于蓖麻遗传多样性分析.用CTAB提取蓖麻基因组DNA,采用正交试验对影响蓖麻RAPD-PCR扩增的反应组分浓度进行优化.结果表明最佳的蓖麻RAPD-PCR反应体系(25μ1)中含10xbuffer 2.5μ1,模板DNA 4ng/μ1,dNTP 0.4mmol/L,引物0.321μmol/L及Taq酶0.1U/μ1.扩增程序为94℃预变性2min;94℃变性30s,35℃退火30s,72℃延伸1min20s;40个循环;72℃延伸5min.通过正交体系优化,获得了较优的蓖麻凡RAPD-PCR反应体系,为蓖麻RAPD分子标记提供了理论基础.
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关 键 词: | 蓖麻 RAPD 正交设计 优化 蓖麻 反应体系 正交优化 Castor Orthogonal Design System 理论 分子标记 体系优化 循环 延伸 退火 预变性 扩增程序 dNTP 模板 最佳 结果 组分浓度 影响 |
Optimization of RAPD-PCR System with Orthogonal Design in Castor |
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Authors: | Chen Yongsheng Hao Weiguo Zhu Guoli Li Jin qin |
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Abstract: | |
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