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蓖麻RAPD-PCR反应体系的正交优化
作者姓名:陈永胜  郝卫国  朱国立  李金琴
作者单位:陈永胜(内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽,028000);郝卫国(内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽,028000);朱国立(内蒙古通辽市农科院,内蒙古通辽,028015);李金琴(内蒙古通辽市农科院,内蒙古通辽,028015)
摘    要:以东北蓖麻为材料建立蓖麻RAPD反应优化体系,用于蓖麻遗传多样性分析.用CTAB提取蓖麻基因组DNA,采用正交试验对影响蓖麻RAPD-PCR扩增的反应组分浓度进行优化.结果表明最佳的蓖麻RAPD-PCR反应体系(25μ1)中含10xbuffer 2.5μ1,模板DNA 4ng/μ1,dNTP 0.4mmol/L,引物0.321μmol/L及Taq酶0.1U/μ1.扩增程序为94℃预变性2min;94℃变性30s,35℃退火30s,72℃延伸1min20s;40个循环;72℃延伸5min.通过正交体系优化,获得了较优的蓖麻凡RAPD-PCR反应体系,为蓖麻RAPD分子标记提供了理论基础.

关 键 词:蓖麻  RAPD  正交设计  优化  蓖麻  反应体系  正交优化  Castor  Orthogonal  Design  System  理论  分子标记  体系优化  循环  延伸  退火  预变性  扩增程序  dNTP  模板  最佳  结果  组分浓度  影响

Optimization of RAPD-PCR System with Orthogonal Design in Castor
Authors:Chen Yongsheng  Hao Weiguo  Zhu Guoli  Li Jin qin
Abstract:
Keywords:
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