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烟草RAPD反应体系的建立与优化研究
作者姓名:
杨友才
周清明
尹晗琪
作者单位:
湖南农业大学烟草工程技术研究中心 湖南长沙410128 (杨友才,周清明),湖南农业大学烟草工程技术研究中心 湖南长沙410128(尹晗琪)
基金项目:
湖南省科技厅重大科技攻关项目(01NKY1002)。
摘 要:
以烤烟品种为材料,研究了烟草RAPD分析过程中的影响因素,包括模板浓度、Mg2 、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于烟草RAPD分析的PCR反应体系:即在25μl反应体系中,模板用量为40ng;引物浓度为0.4μM;Mg2 浓度为2.5mM;dNTP浓度为0.2mM;TaqDNA聚合酶用量为1U。扩增程序为94℃预变性5min;然后94℃变性1min,38℃复性1min,72℃延伸1.5min,39个循环;最后72℃延伸5min。
关 键 词:
烟草
RAPD
反应体系
建立与优化
Establishment and Optimization of RAPD Reaction System in Tobacco
Authors:
Yang Youcai
Zhou Qingmin
Yin Hanqi
Institution:
(Tobacco Engineering and Technology Research Center, HNAU, Changsha 410128)
Abstract:
Keywords:
Tobacco
RAPD
Reaction system
Establishment and optimization
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