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检测牛分枝杆菌的噬菌体生物扩增法的建立及初步应用
引用本文:钟志军,彭广能,唐明霞,白永平,石梅,马晓平,胡忠义,王洁,秦莲花,杨华.检测牛分枝杆菌的噬菌体生物扩增法的建立及初步应用[J].畜牧兽医学报,2007,38(11):1224-1229.
作者姓名:钟志军  彭广能  唐明霞  白永平  石梅  马晓平  胡忠义  王洁  秦莲花  杨华
作者单位:1. 四川农业大学动物医学院,雅安,625014;上海市结核重点实验室,上海,200433
2. 四川农业大学动物医学院,雅安,625014
3. 西南大学荣昌校区动物医学系,重庆,400715
4. 上海市结核重点实验室,上海,200433
基金项目:上海市科学技术委员会科研计划资助项目(044119638)
摘    要:建立噬菌体生物扩增法(PhaB)检测牛分枝杆菌,将建立的方法用于22株牛分枝杆菌临床分离株及20种常见非结核分枝杆菌(NTM)及5种非分枝杆菌,同时对203头疑患牛结核病奶牛的奶样进行检测,其结果与皮内变态试验、涂片法、罗氏培养进行比较。结果表明,噬菌体工作浓度为1×109PFU/mL、37℃感染2 h为最佳检测条件;杀毒剂浓度为100 mmol/L,室温作用10 min即可完全杀灭受试噬菌体;加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染;牛分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和22株牛分枝杆菌临床分离株检测结果均为阳性,16种NTM和5种非分枝杆菌为阴性,4种NTM(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>105CFU/mL)检测结果为阳性;该法可检测出60~120 CFU/mL牛分枝杆菌;批内、批间变异系数均小于15%,重复性良好;203头检测奶牛中,PhaB法、涂片法、皮内变态试验和罗氏培养结果分别有14头(6.9%)、17头(8.4%)、21头(10.3%)和12头(6.0%)为阳性,PhaB法与其他3种方法比较,阳性准确性、特异性都在96%以上,敏感性在71%~100%。该法检测牛分枝杆菌具有快速、简便、灵敏、特异性高等特点。

关 键 词:分枝杆菌噬菌体  牛分枝杆菌  检测方法  牛乳
文章编号:0366-6964(2007)11-1224-06
修稿时间:2006-12-15

Establishment and Preliminary Application of Detection of Mycobacterium bovis by Phage Amplified Biologically Assay
ZHONG Zhi-jun,PENG Guang-neng,TANG Ming-xia,BAI Yong-ping,SHI Mei,MA Xiao-ping,HU Zhong-yi,WANG Jie,QIN Lian-hua,YANG Hua.Establishment and Preliminary Application of Detection of Mycobacterium bovis by Phage Amplified Biologically Assay[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(11):1224-1229.
Authors:ZHONG Zhi-jun  PENG Guang-neng  TANG Ming-xia  BAI Yong-ping  SHI Mei  MA Xiao-ping  HU Zhong-yi  WANG Jie  QIN Lian-hua  YANG Hua
Institution:1. College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University,Yaan 625014,China;2. College of Veterinary Medicine, Southwest University,Chongqing 400715, China ; 3. TB Key Laboratory of Shanghai, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:Mycobacteriophage  Mycobacterium bovis  detect method  milk
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