| 扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 吴芳芳,曹增国,王琪,迟航,金宏丽,冯娜,赵永坤,高玉伟,王化磊,杨松涛,夏咸柱.扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J].中国兽医学报,2018(3):496-501. |
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| 作者姓名： | 吴芳芳 曹增国 王琪 迟航 金宏丽 冯娜 赵永坤 高玉伟 王化磊 杨松涛 夏咸柱 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;吉林农业大学动物科学技术学院;吉林大学动物医学学院; |
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| 摘 要： | 针对扎伊尔型埃博拉病毒(Zaire Ebolavirus,ZEBOV)的糖蛋白(GP)基因(158~368aa)设计引物,将PCR扩增产物克隆至原核表达载体pET30a(+),在宿主菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达。对诱导条件进行优化,纯化后的蛋白通过SDS-PAGE和Western blot鉴定正确后免疫BALB/c小鼠,二免后分离小鼠血清,制备多克隆抗体并进行间接免疫荧光鉴定。结果显示,埃博拉病毒GP在大肠杆菌中以包涵体的形式成功表达,蛋白最佳诱导条件为37℃,0.4mmol/L IPTG诱导6h。经间接免疫荧光鉴定多克隆抗体可以识别重组杆状病毒rBacmid-GP。本研究成功表达并纯化埃博拉病毒GP,制备鼠多克隆抗体,为建立基于ZEBOV GP的检测方法和相关研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 埃博拉病毒 原核表达 糖蛋白(GP) 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of Zaire Ebola virus GP and the preparation of polyclonal antibody |
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