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睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析
引用本文:戴艺民,周以飞,陈建秋,林江波,张剑亮,林龙云,潘大仁.睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析[J].农业生物技术学报,2010,18(4):807-814.
作者姓名:戴艺民  周以飞  陈建秋  林江波  张剑亮  林龙云  潘大仁
作者单位:1. 福建省农科院甘蔗研究所,漳州,363005
2. 福建农林大学作物学院,福州,350002
基金项目:福建省科技攻关重点项目,福建省发改委重点项目 
摘    要:本研究根据同源重组原理,利用电穿孔法将重组质粒pKtac1-act1和pKtac1-act2分别转化睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni),经PCR和Southern blot筛选获得2株睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌。对这两株基因工程菌的关键酶3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase/carbonyl reductase,3α-HSD/CR)表达情况和细菌稳定性的分析结果表明:两株基因工程菌在没有诱导剂诱导的情况下,其3α-HSD/CR的表达量比原始菌提高了近20倍。添加抗生素进行培养,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR表达均较稳定;而在不添加抗生素的培养基上培养时,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR的表达变化较大,蛋白总体表达水平比添加抗生素时低。研究结果可以初步推断,3α-HSD/CR的表达受activator基因的表达调控。

关 键 词:睾丸酮丛毛单胞菌  3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-HSD/CR)  activator  工程菌  稳定性

Construction and Stability Analysis of the Engineered Comamonas testosteroni
Dai Yimin,Zhou Yifei,Chen Jianqiu,Lin Jiangbo,Zhang Jianliang,Lin Longyun,Pan Daren.Construction and Stability Analysis of the Engineered Comamonas testosteroni[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(4):807-814.
Authors:Dai Yimin  Zhou Yifei  Chen Jianqiu  Lin Jiangbo  Zhang Jianliang  Lin Longyun  Pan Daren
Abstract:
Keywords:activator
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