| 小桐子基因组DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 作者姓名： | 欧文军 李开绵 王文泉 |
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| 作者单位： | 欧文军（中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,儋州,571737;海南大学农学院,儋州,571737）;李开绵（中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,儋州,571737）;王文泉（中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海口,571101） |
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| 基金项目： | 科技部科技基础性工作和社会公益研究专项面上项目 |
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| 摘 要： | 为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA.采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高.可作为ISSR分子标记的模板.同时,采用正交设计的方法,对影响小桐子ISSR-PCR反应体系中的4个因素(引物、Taq DNA Polymerase、10xBuffer(含Mg2 )、dNTPs)在3个水平上进行优化试验.建立了适合小桐子的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR最优反应体系,即20μl的反应体系中含有30ng模板DNA、0.2mmol/L dNTP、0.3 U Taq酶Polymerase、0.8μmol/L Primer、3.0hanoi/L10×Buffer(含Mg2 ).
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| 关 键 词： | 小桐子 DNA提取 ISSR反应体系 正交设计 优化 小桐子 基因组 提取 反应体系 优化试验 Reaction Total Buffer Primer DNA Polymerase dNTP 最优 谱带 稳定 水平 因素 影响 方法 正交设计 模板 |
Optimization of Extracting Total DNA and ISSR-PCR Reaction of Jstropha curcas Linn |
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| Authors: | Ou Wenjun Li Kaimian Wang Wenquan |
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