| 致病疫霉酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 陈泓妃,顾赛汝,王洪洋,李灿辉,刘晶.致病疫霉酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定[J].江苏农业科学,2023(13):60-64. |
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| 作者姓名： | 陈泓妃 顾赛汝 王洪洋 李灿辉 刘晶 |
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| 作者单位： | 云南师范大学云南省马铃薯生物学重点实验室/云南师范大学云南省高校马铃薯生物学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(编号：32101665)；;广东省基础与应用基础研究重大项目(编号：2021B0301030004)；;云南师范大学大学生科研训练基金(编号：KX2021109)； |
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| 摘 要： | 致病疫霉是引起马铃薯晚疫病的重要病原菌，在全世界范围内造成了严重的经济损失。以2种不同致病力的致病疫霉菌株侵染马铃薯叶片5个时间点的混合菌丝样品作为cDNA文库的材料来源，利用Gateway法分别构建了初级文库与次级文库，初级文库与次级文库的库容量分别为1.60×107、1.52×107 CFU,插入片段长度大多在1 000～2 000 bp之间，重组率均达到100%。次级文库质粒转化酵母菌构建酵母文库，所得酵母文库滴度为1.00×108 CFU/mL,转化效率为6×108 CFU/μg。结果表明，本研究构建的酵母双杂交cDNA文库质量较高，完全可以满足互作蛋白高质量、高效率筛选的要求。该文库为后续深入解析致病疫霉的致病机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 致病疫霉 马铃薯 酵母双杂交 cDNA文库 |
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