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鸡CaBP-D28k基因克隆、序列测定及其真核表达质粒的构建
引用本文:俞路,王雅倩,章世元,孙怀昌,王志跃,孙龙生,李燕舞,李治学,周联高,严桂芹.鸡CaBP-D28k基因克隆、序列测定及其真核表达质粒的构建[J].畜牧兽医学报,2008,39(10).
作者姓名:俞路  王雅倩  章世元  孙怀昌  王志跃  孙龙生  李燕舞  李治学  周联高  严桂芹
作者单位:1. 扬州大学动物科学与技术学院,扬州,225009
2. 扬州大学兽医学院,扬州,225009
基金项目:扬州大学校科研和校改项目 
摘    要:采集200日龄产蛋新扬州鸡小肠组织直接提取总RNA进行反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)扩增,扩增产物进行克隆、测序,获得了新扬州鸡CaBP—D28k基因序列。序列测定表明,CaBP—D28k基因核苷酸长度为789bp,编码262个氨基酸。与GenBank上发表序列(NM_205513.1)比较,核苷酸同源性为99.9%,在760bp处存在G→T的错义突变。与从GenBank下载的马、人、小家鼠、蟾蜍序列进行比较分析,核苷酸同源性分别为79.3%、79.1%、77.4%、77.3%。将该基因片段克隆到真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CaBP—D28k,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为利用pCEP4-CaBP—D28k调控蛋禽钙代谢、改善蛋壳质量的研究应用奠定了基础。

关 键 词:  CaBP  -D28k  基因克隆  真核表达载体

Gene Cloning, Sequencing and Eukaryotic Expression Plasmid Construction of Chicken Calbindin-D28k
YU Lu,WANG Ya-qian,ZHANG Shi-yuan,SUN Huai-chang,WANG Zhi-yue,SUN Long-sheng,LI Yan-wu,LI Zhi-xue,ZHOU Lian-gao,YAN Gui-qin.Gene Cloning, Sequencing and Eukaryotic Expression Plasmid Construction of Chicken Calbindin-D28k[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(10).
Authors:YU Lu  WANG Ya-qian  ZHANG Shi-yuan  SUN Huai-chang  WANG Zhi-yue  SUN Long-sheng  LI Yan-wu  LI Zhi-xue  ZHOU Lian-gao  YAN Gui-qin
Abstract:
Keywords:CaBP-D28k
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