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光滑型布鲁氏菌LPS单克隆抗体的制备及鉴定
引用本文:王加兰,胡森,郑孝辉,范蕾,步志高.光滑型布鲁氏菌LPS单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(8).
作者姓名:王加兰  胡森  郑孝辉  范蕾  步志高
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150001
摘    要:为制备抗布鲁氏菌单克隆抗体(MAb),本研究用灭活的布鲁氏菌疫苗M5-90株免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术获得杂交瘤细胞.以布氏杆菌疫苗株M5-90、S-19及小肠结肠炎耶尔森菌0:9的脂多糖(LPS)分别作为抗原包被酶标板,对杂交瘤细胞进行筛选,获得两株稳定分泌抗光滑型布氏杆菌LPS(S-LPS)MAb的细胞4G6和16C5.特异性分析表明,MAb 4G6除与耶尔森0:9全菌体有轻微的交叉反应外与其它革兰氏阴性菌无交叉,而16C5完全排除了与其他各菌的交叉反应.Ig亚型分析表明,所制备MAb的轻链亚类均为κ,4G6重链为IgM.16C5重链为IgG3.用Protein G亲和层析纯化MAb 16C5腹水并初步用于竞争ELISA方法,检测布氏杆菌抗体水平,结果表明了该实验方法的有效性.本研究制备的MAb 16C5具有高度的特异性和敏感性,排除了与其他革兰氏阴性菌的交叉反应,为建立一种诊断布鲁氏病的快速、有效、敏感的方法奠定了有力的基础.

关 键 词:布鲁氏菌  脂多糖(S-LPS)  单克隆抗体

Preparation and identification of the monoclonal antibody against smooth Brucella LPS
WANG Jia-lan,HU Sen,ZHENG Xiao-hui,FAN Lei,BU Zhi-gao.Preparation and identification of the monoclonal antibody against smooth Brucella LPS[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(8).
Authors:WANG Jia-lan  HU Sen  ZHENG Xiao-hui  FAN Lei  BU Zhi-gao
Abstract:
Keywords:
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