| 弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 朱佳琪,张小燕,黄金林,焦新安.弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国动物检疫,2014,31(12):70-74. |
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| 作者姓名： | 朱佳琪 张小燕 黄金林 焦新安 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31372449）、国家科技支撑计划（2014BAD13B02）、江苏高校优势学校建设工程项目、江苏省普通高校研究生科研创新计划项目（CXLX13-922）资助 |
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| 摘 要： | 根据弯曲菌16S rRNA基因的靶序列设计特异性引物和探针，对反应条件和试剂浓度进行优化，建立了快速检测鸡肉中弯曲菌的荧光定量PCR方法，并对其特异性、敏感性和重复性进行评价。该方法除了对弯曲菌有扩增曲线外，对其他常见食源性病原菌均未有扩增曲线，具有较好的特异性；弯曲菌的最低检测限为10 CFU/mL；重复性实验获得标准曲线相关系数为R2=0.999，批内可重复性变异系数在0.12%-2.1%之间，批间可重复性变异系数为1.7%。应用该方法对68份鸡肉样品检测弯曲菌阳性率为95.6%（65/68），传统分离方法阳性率为89.5%（60/68），两种方法的阳性符合率为89.7%。本研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好、操作简单，大大缩短检测周期，可作为检测鸡肉样品中弯曲菌的手段，为鸡肉样品弯曲菌的流行病学调查研究提供新的工具。
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| 关 键 词： | 弯曲菌 16S rRNA基因 荧光定量PCR |
Development and Application of Real-time PCR Assay for Quantitative Detection of Campylobacter spp |
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| Zhu Jiaqi,Zhang Xiaoyan,Huang Jinlin,Jiao Xinan.Development and Application of Real-time PCR Assay for Quantitative Detection of Campylobacter spp[J].China Journal Of Animal Quarantine,2014,31(12):70-74. |
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| Authors: | Zhu Jiaqi Zhang Xiaoyan Huang Jinlin Jiao Xinan |
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