鸡沙门氏菌弱毒冻干苗的研制

由减毒鸡沙门氏苗97A疫苗株作为制苗用菌种，经普通琼脂培养，冷冻真空干燥等工艺生产鸡沙门氏菌弱毒疫苗4批，每批疫苗分别以免疫剂量接种6日龄AA肉鸡，免疫第14天时，用强毒株Sg9和Sp4攻击，免疫组死亡保护率均达90％以上，试验结果表明，该苗具有良好的安全性和免疫效果。     

单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌的比较

本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,而用PCR法则能检测出。检测鲜牛奶、龙虾、虾仁、熟食制品等样品 ,2种方法的符合率达 97 6 %。对冻虾仁、人粪便样品的前增菌、选择性增菌、后增菌过程进行同步检测 ,在样品的前增菌液 ,直接ELISA法检测的OD值小于 0 5 ,而PCR法扩增能出现特异条带 ,经国标方法验证为阳性 ,证实PCR法的敏感性优于直接ELISA法 ,而在选择性增菌液和M 肉汤后增菌液中 ,2种方法均能检出阳性样品。     

部分省市鸡群空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的流行状况分析

本研究采用多重PCR方法对我国部分省市不同品种、不同类型的鸡群进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查。结果发现,在3132份鸡肛门棉拭样品中,检测出583份空肠弯曲菌阳性样品,平均阳性率18.61％;48份结肠弯曲菌阳性,平均阳性率1．53％。鸡饲养环境样品217份,6份空肠弯曲菌阳性,阳性率2．76％。不同鸡群感染率悬殊较大,空肠弯曲菌阳性率从0％-73．3％、结肠弯曲菌阳性率从0％-7．4％。30个鸡群中空肠弯曲菌阳性率为86.67％,结肠弯曲菌阳性率43．33％。本调查结果表明我国鸡群中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的流行呈现多样化。     

融合表达淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和卵清白蛋白CD8+T细胞表位的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建与鉴定

依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8 T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8 T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两条编码LCMV和OVA CD8 T细胞表位的寡核苷酸片段,经退火后,克隆入绿色荧光蛋白表达质粒pYAGFP,经PCR扩增和序列测定分析,证实成功构建T细胞表位与绿色荧光蛋白融合表达的重组质粒pYAGFPL-O,将此重组质粒pYAGFPL-O转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,获得重组沙门氏菌X4550(pYAGFPL-O).用SDS-PAGE电泳测得重组菌表达的融合蛋白约为30kD.同时,荧光显微镜下观察到X4550(pYAGFPL-O)发出黄绿色荧光.这些结果表明LCMV和OVA T细胞表位已成功表达.重组菌X4550(pYAGFPL-O)的获得为研究沙门氏菌载体携带外源抗原的T细胞应答规律及调控机理打下了重要基础.     

我国禽病的防治战略

我国养禽业连续20多年持续稳步增长，取得举世瞩目的成就，成为世界养禽大国。据农业部统计．2000年我国肉类总产量达6270万吨，人均占有量为52kg。另据联合国粮农组织(FAO)统计资料．2000年我国禽蛋的产量达到2216．234万吨，占世界总产量的41．9％，其中鸡蛋1886万吨，占总产量的85％，     

生猪屠宰加工流通环节沙门氏菌的监测研究

沙门氏菌作为食品中致病菌检测的一项重要指标，在公共卫生．食品卫生．畜牧兽医和口岸检疫中都有重要的意义，本研究采用黄金林介绍的直接ELISA和PCR联合检测沙门氏菌的方法对生猪屠宰加工流通环节的沙门氏菌进行分子流行病学监测，取得了满意结果。对了解目前生猪屠宰加工流通环节中沙门氏菌污染率的现状和更好、有针对性的控制沙门氏菌具有重要意义。     

减毒鸡沙门菌疫苗株97A的免疫保护效力试验

减毒沙门菌疫苗株97A免疫鸡经鸡沙门菌强毒株Sg9攻击后,对免疫攻毒组和攻毒对照组鸡进行病理学检查和细菌分离,以进一步评价97A疫苗的免疫保护效力。结果表明,免疫攻毒组鸡肝脏、肺脏和肾脏等实质器官仅有轻到中度的炎症反应,而攻毒对照组鸡则表现出了严重的组织病理学变化,同时减毒鸡沙门菌疫苗株97A能显著地限制强毒株在鸡体内的定居和增殖,显示出了良好的免疫保护效力。     

如何控制食源性人兽共患细菌病

食源性疾病是食品安全的主要问题，世界卫生组织将食源性疾病定义为：”通过摄食进入人体导致人体患感染性或中毒性的疾病”。这里包括了由食品生物性污染和化学物质残留引起的食源性疾病。美国每年有7600万例食源性疾病患者，占美国人口的1／3；由生物性危害因素引起的暴发起数占总发生起数的83％，暴发人数占总人数的99％。据世界卫生组织统计报告，发达国家死于食物中毒的儿童中，70％是由微生物性食物中毒所致。     

应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌

根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物，对沙门氏菌属A－F各群中共15株沙门氏菌标准菌株、27株沙门氏菌现场分离菌株和其他10株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应（PCR）扩增，结果沙门氏菌均出现495bp特异性DNA扩增条带，所有对照均未出现特异条带，提示这对引物具有很强的沙门氏菌属特异性。PCR敏感性试验显示，该体系能检出14pg以上的沙门氏菌DNA。通过对5种不同的DNA模板提取方法的比较，选择操作简便、快速、成本低廉的热裂解法。采用该方法。采用该方法，对生鲜奶样进行检测，经与国家标准卫生检验方法相比较，两者符合率达100％。     

直接ELISA与PCR联合检测人粪便中的沙门氏菌

采用直接酶联免疫吸附试验(ELISA)与PCR相结合的方法,对某市饮食行业健康人群的1 426份人粪便样品进行沙门氏菌检测,并与国家标准方法对比,直接ELISA法的敏感性和特异性分别达100%和97.2%,PCR法的敏感性和特异性均为100%.确定的沙门氏菌快速检测优化程序为对大量样品采用直接ELISA筛检,去除阴性样品,阳性样品采用PCR法作进一步鉴定;需要定型时则用国家标准方法.此法具有高度的特异性、敏感性和快速简便等优点.