鹿茸多肽提取分离纯化及药理作用研究进展

鹿茸多肽具有抗炎、抗氧化、增强免疫并能促进细胞分化、伤口愈合、抑制肿瘤细胞、促进神经系统、周围神经系统组织的再生等药理作用,是鹿茸中最有效的成分之一。文中对鹿茸多肽的提取,分离纯化及药理作用研究进展进行了综述,希望为鹿茸多肽的研究和开发提供参考。     

微射流均质预处理提高大豆分离蛋白酶解效率及酶解产物乳化性能

为了探讨微射流均质预处理对大豆分离蛋白酶解效率及酶解产物乳化性能的影响,该文研究比较了微射流均质预处理前后大豆分离蛋白酶解产物的理化性质(水解度、亚基组成、蛋白溶解性、表面疏水性和分子量分布)和乳化性能(通过测定分析样品乳状液的平均粒径和微观结构评估样品的乳化性能)的变化。研究表明:大豆分离蛋白经过微射流均质预处理后采用木瓜蛋白酶水解,其酶解产物(水解度为1.7%)与对照大豆分离蛋白和未经预处理的酶解产物相比,在较低浓度下(30 g/L)制备出粒径细小的稳定乳状液(体积平均粒径≈1.6μm)。微射流均质预处理提高了大豆分离蛋白中α-7S和A-11S亚基的酶解敏感性,使酶解产物在水解度1.3%~1.7%范围内蛋白溶解性显著增加(P0.05),同时保持较高的表面疏水性值,与未经预处理的酶解产物相比形成了更多具有界面活性的可溶性多肽(分子量主要分布在11.3 k Da左右),在乳化过程中可有效防止乳液滴间发生桥联絮凝。因此微射流均质预处理是一种辅助提高大豆蛋白酶解效率和酶解产物乳化性能行之有效的方法。研究结果可为大豆蛋白深加工蛋白乳化剂提供理论和方法参考。     

对绿盲蝽具有杀虫活性Bt菌株的筛选及Cry15Aa蛋白活性的研究

Bt棉有效控制了棉田主要害虫棉铃虫(Helicoverpa armigera),然而原来处于次要地位的刺吸式口器害虫盲蝽(Heteroptera:Miridae)为害逐年加重,目前对绿盲蝽(Apolygus lucorum Meyer-Dür)有效的抗虫基因未见报道。本研究以本实验室保存的Bt杀虫基因和菌株为材料,对绿盲蝽进行杀虫活性筛选。利用本实验室先前克隆的Mtx类杀虫基因cry15Aa表达产物进行绿盲蝽杀虫活性测定,研究结果显示Cry15Aa蛋白对绿盲蝽具有一定的杀虫活性。通过杀虫活性测定,获得对绿盲蝽有效的Bt菌株20株;对这些菌株表达蛋白进行质谱鉴定,LC-MS/MS质谱鉴定结果显示,这些菌株可能含有Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ae、Cry1Af、Cry1Ag、Cry1Ah、Cry1Ba、Cry1Be、Cry8Ha等十余种对鳞翅目、鞘翅目害虫有杀虫活性的蛋白片段,并且有4株Bt菌株样品中检出了Mtx类杀虫蛋白Cry15Aa的片段。但是进一步基因鉴定结果表明,这4株菌株并不含有cry15Aa全长基因,推测这些菌株中含有Cry15类的新基因。上述研究结果表明这些菌株中可能存在对盲蝽有效的新型杀虫蛋白。本研究在发现了cry15Aa基因所表达的蛋白对绿盲蝽具有杀虫活性的同时,获得了对绿盲蝽具有杀虫活性的Bt新菌株,对绿盲蝽的生物防治具有重要的意义。     

The characterization of Nigerian varieties of pepper, Capsicum annuum and Capsicum frutescens by SDS- polyacrylamide gel electrophoresis of seed proteins

The possibility of using electrophoresis to characterize varieties of pepper, Capsicum annuum and Capsicum frutescens cultivated in Nigeria was investigated. The SDS- polyacrylamide gel electropherogram of extracted total seed proteins of 10 breeding lines in each of the 6 varieties investigated, revealed a pattern in which 12 polypeptide bands with apparent molecular weight range of 22 to 98 kilodaltons could be distinguished. The result showed that the six varieties could be characterized on the basis of presence/absence and staining intensities of 7 polypeptide bands. It is suggested that SDS- polyacrylamide gel electrophoresis of seed proteins provides a useful analytical technique for the characterization of varieties of pepper and there may be genotype duplicates in the collection of Nigerian Capsicum germplasm.     

NDV单抗针对多肽抗原的鉴定

经对液氮保存的抗鸡新城疫病毒单抗杂交瘤细胞株进行复苏、再克隆,并用ELISA 和IIF筛选,得到24 株分泌力较强的细胞株。将这些细胞株再接种BALB/C小鼠,取其腹水进行预处理,测其ELISA 效价、IIF效价,并用Westernblotting 测定它们所针对的中国标准强毒株F48 E8 的多肽抗原表位。测得的结果均为针对血凝素-神经氨酸酶的单抗     

RNA干扰技术抑制新家坡石斑鱼虹彩病毒感染细胞多肽ICP46与绿色荧光蛋白融合基因的表达

新加坡石斑鱼虹彩病毒（singapore grouper iridovirus,SGIV）是一种严重的能引起全身性疾病的病原体,对石斑鱼养殖造成了重大的经济损失。将含有SGIV感染细胞多肽ICP46（infected cell polypeptides 46）基因的真核表达载体pEGFP-ICP46转染到胖头鲤细胞（fathead minnow cells,FHM）中进行融合表达,用荧光显微镜观察到ICP46-GFP融合蛋白主要分布于FHM细胞的细胞质中。根据SGIV-ICP46的序列,设计并体外化学合成了特异性干扰SGIV-ICP46的siRNA（siRNA-ICP46）,与pEGFP-ICP46共转染到FHM细胞中,通过荧光显微镜观察不同时间点荧光强度的变化。转染后24~48 h,实验细胞（共转染siRNA-ICP46和pEGFP-ICP46）和阳性对照细胞（共转染siRNA-GFP和pEGFP-ICP46）中的荧光微弱,发荧光的细胞数量较阴性对照（共转染siRNA-Negative和pEGFP-ICP46）少70%左右,但其后实验细胞和阳性对照细胞的荧光强度开始增强,在转染后72 h其与阴性对照组已差别不大。说明体外化学合成的siRNA-ICP46转染后24~48 h可有效抑制FHM细胞中外源导入SGIV-ICP46基因的表达。     

Activity of the antimicrobial polypeptide piscidin 2 against fish ectoparasites

Abstract The antiparasitic effects of piscidin 2, an antimicrobial polypeptide (AMPP) first isolated from mast cells of hybrid striped bass, were tested against three protistan ectoparasites of marine fish (the ciliates Cryptocaryon irritans and Trichodina sp., and the dinoflagellate Amyloodinium ocellatum) and one ciliate ectoparasite of freshwater fish (Ichthyophthirius multifiliis). I. multifiliis was the most susceptible parasite, with all theronts killed at 6.3 microg mL(-1) piscidin 2. The most resistant parasite was Trichodina, where a few cells were killed at 12.5 microg mL(-1), but several were still alive even at 100 microg mL(-1). C. irritans was of intermediate sensitivity, with some theronts killed at 12.5 microg mL(-1) and all killed at 25 microg mL(-1). High parasite density apparently exhausted the piscidin 2 before it could attain its maximal effect, but surviving parasites were often visibly damaged. The lower efficacy of piscidin 2 against marine parasites compared with the freshwater ciliate might be related to the inhibitory effects of high sea water cation levels. The tissue concentration of piscidins estimated in healthy hybrid striped bass gill (40 microg mL(-1)) suggests that piscidin 2 is lethal to the parasites tested at physiological concentrations and is thus an important component of innate defence in fish expressing this type of AMPP.     

多肽对香蕉幼苗生长及根系活力的影响

以巴西蕉组织培养苗为试材，研究不同多肽浓度(600、800、1 000、1 200倍液)对巴西蕉幼苗生长及根系活力的影响。结果表明，外源多肽处理能促进巴西蕉幼苗的生长，增加根重、苗高、叶片长度和宽度，同时还能提高巴西蕉幼苗根系活力，但是对根长影响不显著。在试验的各个浓度中，以600倍液的处理效果最好。     

聚天门冬氨酸同源多肽的水稻产量效应和磷素营养吸收效应研究

聚天门冬氨酸同源多肽对水稻产量效应研究表明,聚天门冬氨酸同源多肽对水稻秧苗生长和根的生长有较大的促进作用,根的鲜重、干重和根长分别比清水对照增加28.2%、46.2%、17.9%,对水稻经济性状及产量也有较好的作用,有效穗数、实粒数、千粒重、考种产量和实际产量分别比清水对照增加14.21%、13.44%、2.38%、16.80%、7.74%。利用32P同位素示踪试验研究了聚天门冬氨酸同源多肽对水稻磷素营养吸收的效应,发现喷施聚天门冬氨酸同源多肽的初期对水稻吸收肥料磷有抑制作用。随着时间的推移,聚天门冬氨酸同源多肽本身含有的速效磷被完全吸收后,聚天门冬氨酸同源多肽的富集作用逐渐表现出来,从而表现为20 d时处理的水稻对磷素的吸收略有增加。30 d时,由于聚天门冬氨酸同源多肽逐渐被微生物降解,大量释放出被固定的磷素,表现为测量时的结果比对照略有降低。     

聚天门冬氨酸同源多肽对西红柿生长发育和抗病性的影响

以夏红1号和长葫芦柿为试材,采用田间小区试验和田间调查试验,研究聚天门冬氨酸同源多肽对西红柿生物学性状和产量的影响。结果表明:聚天门冬氨酸同源多肽可增强西红柿生长势,使西红柿提早进入结果期,聚天门冬氨酸同源多肽对西红柿的增产作用达极显著水平,单位面积产量比对照增加9.33%;其销售量比对照增加37.52%,以销售收入核算的产出投入比达10.91,可显著提高西红柿的经济收益。田间试验调查发现:聚天门冬氨酸同源多肽对培育西红柿壮苗效果显著,对西红柿的大田长势及抗病方面也有显著的积极作用,并且病虫害的发生比对照明显减少。