东北山葡萄酵母菌基因组DNA提取方法的比较研究

利用液氮研磨法、蜗牛酶法和玻璃珠法提取东北山葡萄分离的酵母菌株S60基因组DNA,采用琼脂糖凝胶电泳、微量核酸蛋白测定仪和PCR方法检测基因组DNA的纯度和浓度。结果显示,蜗牛酶法提取的酵母菌基因组DNA纯度最好、浓度最高;液氮研磨法提取的基因组DNA浓度虽然较高,但含有较多的蛋白等杂质;玻璃珠法提取的酵母菌基因组DNA纯度和浓度均最低。     

用酶法对啤酒酵母细胞破壁优化条件的研究

试验旨以溶菌酶、蜗牛酶对啤酒酵母进行破壁,从中筛选出最佳的破壁条件。以啤酒酵母作为破壁酵母细胞,采用四因素四水平的正交试验设计进行试验。结果表明,酶量10 mg.mL-1,pH 5.0,温度45℃,时间6 h时的破壁率均高于以上各因素的水平。各因素对破壁率的影响顺序为:温度>时间>酶量>pH。蜗牛酶和溶菌酶破壁率差异不显著(P>0.05)。结果揭示本试验条件下溶菌酶、蜗牛酶最佳破壁条件为酶量10 mg.mL-1,pH 5.0,温度45℃,时间6 h。     

产朊假丝酵母原生质体制备的研究

利用产朊假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｕｔｉｌｉｓ）２．２８１株研究了原生质体的制备。结果表明,该菌经复合剂０．１４ｍｏｌ·Ｌ－１β－ＭＥＴ、０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＤＴＡ予处理;蜗牛酶浓度为７０ｍｇ·（１０ｍＬ）－１;并于３０℃酶解１２０ｍｉｎ;是制备原生质体的理想条件     

原生质体融合技术筛选高产虾青素酵母菌株

采用原生质体融合技术,以红发夫酵母突变株和黏红酵母突变株为亲本菌株,以原生质体形成率和再生率的乘积为检测指标,对菌株菌龄、酶解温度、酶解时间和渗透压稳定剂等原生质体形成和再生的条件进行研究。结果表明,处于对数生长前期的红发夫酵母和处于对数生长中期的黏红酵母原生质体形成率和再生率的乘积显著高于其他组(P<0.05);红发夫酵母原生质体形成率和再生率的乘积在酶解温度22 ℃时为17.34%,在25和28 ℃时为0,黏红酵母形成率和再生率的乘积在22和25 ℃时显著高于28 ℃(P<0.05),但2个温度之间差异不显著(P>0.05);2菌株原生质体形成率和再生率的乘积在酶解时间为2 h时显著高于其他组(P<0.05);对照组渗透压稳定剂的组合对原生质体形成率和再生率的乘积显著高于其他组(P<0.05)。红发夫酵母和黏红酵母原生质体形成和再生的最适条件为:红发夫酵母菌龄为14 h、黏红酵母菌龄为18 h、酶解温度均为22 ℃、酶解时间均为2 h,原生质体形成的最适渗透压稳定剂均为1.0 mol/L的KCl缓冲液,再生的最适渗透压稳定剂均为17%蔗糖稀释液;最后筛选出1株能在28 ℃生长良好且虾青素含量586.38 μg/g的融合子,比融合前红发夫酵母和黏红酵母分别提高了79.58%和64.08%,且传代多次生产性能稳定。