干旱胁迫诱导新疆野苹果细胞程序性死亡的细胞形态学研究

用聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG6000)处理新疆野苹果(Malus sieversii(Ledeb)Roem.)幼苗。通过对其叶片及根系中各细胞器的超微结构分析发现,干旱胁迫能诱导新疆野苹果发生细胞程序性死亡,并具有以下特点:随着干旱处理时间的延长,根系中各细胞器形态结构发生变化的时间普遍早于叶片;同是叶片,海绵组织中各细胞器形态结构发生变化的时间早于栅栏组织;同是根系,皮层细胞中各细胞器形态结构变化的时间普遍早于中柱细胞。     

苹果种质资源对苹果树腐烂病抗性评价

为全面了解苹果种质资源对苹果树腐烂病的抗性情况,利用2个不同来源的苹果腐烂病菌株,连续2 a对204份苹果种质资源进行了枝条离体接种鉴定。结果表明,接种后不同的种质资源的发病率和严重度均表现出丰富的多样性。西洋苹果资源（Malus domestica Borkh.）中发病率较低-极低的品种和类型所占的比例较高（16.6...     

供铁水平对不同苹果基因型生长及根系特性的影响

以小金海棠 (MalusxiaojinensisChengetJiang)和山定子 (MalusbaccataL .Borkh)为试材 ,研究供铁水平对其生长及根系特性的影响 ,结果表明 ,在幼苗生长量、新叶叶绿素含量、营养液pH日变化、根系活力、根系ATP酶活性诸方面 ,存在基因型差异。同一供铁水平 ,小金海棠有明显的铁胁迫反应 ,而山定子铁胁迫反应较弱。低铁胁迫处理 ,小金海棠叶片叶绿素含量、根系活力、根系ATP酶活性皆明显高于山定子。根系活力及根系ATP酶活性可用作铁高效基因型植物的筛选指标     

树莓SSR反应体系的优化及应用

本研究主要对树莓SSR-PCR体系进行优化,以‘来味里（Reveille）’红树莓为试材,利用L9（34）正交试验设计和两因素完全随机试验,研究各主要参数的适宜浓度,建立适合树莓SSR反应的最佳体系,并通过16个不同的树莓栽培品种对优化后的体系进行验证。结果表明：各影响因素中,引物浓度的变化对扩增结果的影响最大,优化后的最佳反应体系（25μL）中,Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1.0U和30ng;Mg2＋、dNTP和引物最适浓度分别为1.5、0.2mmol/L和0.4μmol/L。利用优化后的反应体系和10对SSR引物对16个树莓品种进行PCR扩增,不同品种间扩增结果稳定,多态性位点丰富,共有54个等位位点,表明该体系稳定可靠,适合树莓的SSR分析。     

山葡萄cDNA-AFLP体系的建立及引物的筛选

以山葡萄品种左山一的叶片和花芽为材料,对cDNA-AFLP体系的几个关键因素进行摸索,建立了适宜山葡萄的cDNA-AFLP反应体系.结果表明,提取山葡萄的花芽RNA适宜用改良的CTAB法,提取叶片RNA适宜用SDS-酸酚法.在2x Y/T Buffer的作用下,500 ng的cDNA利用Mse Ⅰ与EcoR Ⅰ双酶切4 h即可酶切完全,将16℃连接过夜的产物稀释5倍作为预扩增的模板,预扩增产物稀释20倍作为选扩模板能获得带型稳定可重复性好的结果.     

小金海棠Fe^3＋-还原酶基因MxFRO在酵母中的表达及Fe^3＋-还原酶活性检测

从铁高效基因型小金海棠(Malus xiaojinensis)中克隆了Fe3 -还原酶基因MxFRO.半定量RT-PCR结果表明MxFRO在小金海棠的根和叶中均受缺铁胁迫诱导.将MxFRO转入野生型酵母(Saccharomyces cerevisitae)中,结果表明转基因酵母的Fe3 -还原酶活性是对照的2.8倍,实验初步证明MxFRO基因编码的蛋白具有Fe3 -还原酶活性.     

MxIrt1基因瞬时表达载体的构建及其定位的初步研究

以绿色荧光蛋白为标记,构建瞬时表达载体pMxIRT1-GFP。以基因枪轰击洋葱表皮细胞,通过激光共聚焦显微镜(Confocal)观察,MxIrt1基因主要定位在细胞膜上。     

水分胁迫对苹果属植物叶片超微结构的影响

水分胁迫使苹果属植物Chl、Car含量下降,叶肉细胞叶绿体遭到破坏,抗旱性较弱的平邑甜茶受损的程度明显大于抗旱性较强的新疆野苹果。     

干旱胁迫诱导苹果属植物细胞程序性死亡的研究

用聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG6000) 对苹果属植物平邑甜茶(Malus hupehensis pampReld. ) 和新疆野苹果〔M. sieversii (Ledeb) Roem. 〕幼苗进行水分胁迫处理, 通过Southern杂交和Western杂交的方法检测胁迫条件下幼苗体内DNA Ladder及Caspase23蛋白酶。Southern杂交结果表明, 干旱处理后, 两种苹果的根和叶片中都有DNA Ladder产生; Western杂交结果显示, 在苹果的叶片中有杂交印迹,而根中没有。这说明干旱胁迫可以诱导两种苹果属植物发生细胞程序性死亡, 并且在细胞程序性死亡过程中叶片中都有类Caspase-3蛋白酶的产生。     

小金海棠类黄色条纹蛋白基因MxYSL7的克隆与表达分析

为了解铁高效基因型小金海棠抗缺铁的分子机制,对与铁运输相关的YSL基因进行了克隆与分析.分析苹果的EST库得到一个686 bp的YSL基因片段.经3′-RACE及后期拼接得到1 500 bp的该基因的3′端序列.其预测蛋白含10个跨膜区,与拟南芥AtYSL7基因同源性达71%,命名为MxYSL7.RT-PCR及Northern分析表明,小金海棠的该基因只在地上部分表达:在茎与成熟叶中,随着低铁处理时间的延长,该基因表达量减少;随着高铁处理时间的延长,该基因表达量增多.新叶中的表达趋势与茎和成熟叶中的趋势正好相反.讨论了MxYSL7在小金海棠体内铁营养代谢中的作用.认为MxYSL7可能参与了体内铁在木质部和韧皮部的运输过程,并参与铁在体内的解毒过程.