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本研究根据基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式反转录实时荧光PCR检测PBRSV的新方法.该方法采用E.Z.N.A TM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术.第二步半巢式反转录实时荧光PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高.实验结果表明,该方法检测灵敏度可达300fg/μL植物总RNA. 相似文献
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本研究根据基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式反转录实时荧光PCR检测PBRSV的新方法.该方法采用E.Z.N.A TM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术.第二步半巢式反转录实时荧光PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高.实验结果表明,该方法检测灵敏度可达300fg/μL植物总RNA. 相似文献
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为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30 ℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7 拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测。笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测。 相似文献
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苹浅褐卷蛾及其检疫技术 总被引:1,自引:0,他引:1
苹浅褐卷蛾Epiphyas postvittana(Walker)在新西兰是苹果、梨、柿子、葡萄等水果上重要的害虫种类,该虫被列为我国苹果上潜在危险性害虫之一。本文对苹浅褐卷蛾的形态特征、发生和为害规律及其检疫和防治技术进行了较为详细的阐述,以期为该害虫在我国的检疫和防治提供参考。 相似文献
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以人参皂甙-Rb_1、-Rb_2、-Rb_3、-Rd、-Re、-Rg_1、-Rg_2、-Rh_1、-Rh_2、拟人参皂甙-F_(11)及-RT_5为标准品,利用薄层层析对西洋参茎叶总皂甙进行了定性分析,采用比色法和双波长薄层扫描法测定了总皂甙、单体皂甙、分组皂甙含量。结果表明,总皂甙中含有16种以上的单体皂甙,其含量为83%以上;单体皂甙中拟人参皂甙-F_(11)含量最高;分组皂甙中原人参二醇皂甙高于原人参三醇皂甙含量,奥科提罗醇(Ocotillol)皂甙含量最低。此文属首次报道。 相似文献
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2005年1月,烟台局技术中心在对美国进口大豆进行检验检疫时,截获菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus),经中国检验检疫科学研究院动植物检疫所病毒中心复核,确认为菜豆荚斑驳病毒.这是国内继上海局首次检出后,烟台局再次截获该病毒.目前烟台局正对该批大豆加强检疫监管. 相似文献