木霉REMI转化体耐热机理的初步研究

本文利用蛋白质电泳、基因克隆和荧光定量PCR等技术对耐高温木霉REMI转化体的抗逆机理进行了初步研究。结果表明,耐高温木霉REMI转化体的蛋白质谱带明显多于出发菌株T21,且差异主要集中在Rf值大于0.593的区域,该区域主要是小分子的热休克蛋白,说明影响耐高温木霉REMI转化体对温度耐受性的蛋白主要以小分子量蛋白质为主。对其中一种热休克蛋白HSP24的基因进行克隆、测序,结果表明不同木霉REMI转化体和出发菌株T21间该基因序列没有差异,但经荧光定量PCR对HSP24基因转录检测表明,耐高温木霉REMI转化体的热激蛋白HSP24的表达量有所增加,从而表明REMI插入提高了该基因的转录水平。     

木霉菌REMI转化体对番茄灰霉病的防治及其机理的研究

研究不同木霉菌转化体对番茄灰霉病防治效果及机理,为木霉菌生物防治的合理利用奠定基础。利用限制性内切酶介导基因整合技术(restriction enzyme-mediated integration,REMI),通过插入线性化质粒DNA获得了生物防治番茄灰霉病(Botrytis cinerea)效果优于出发菌T21菌株(出发菌)的3个木霉菌转化体Ttrm31、Ttrm34和Ttrm55,对侵染花器和叶片的灰霉病防效分别比原生物防治木霉菌株提高了16.9%和8%。木霉菌转化体的产孢能力、分生孢子的萌发率、对碳氮源的利用能力及对高温的抵抗能力都有所提高;木霉菌转化体本身产生的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性均比出发菌高,因此通过REMI技术可以获得新的有益木霉菌转化体,在一定程度上提高了生物菌株防治番茄灰霉病的水平。说明REMI技术可以用于改良生防木霉菌株的功能,提高生物防治效果。     

木霉菌胞外酶及对番茄灰霉病菌作用的研究

研究了木霉菌T21及其4种长势好抗逆性较强的REMI转化体对番茄灰霉病菌抑菌能力,温室防效以及其发酵液中几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶和纤维素酶的活性。结果表明:5株木霉菌株对番茄灰霉病病菌都有不同程度抑制作用,其中Ttrm68抑制效果最好,培养一定时间后,木霉可以把番茄灰霉病菌完全覆盖;温室防效也是Ttrm68的效果最好。胞外酶活性的测定结果表明:对番茄灰霉菌抑制效果好的木霉菌几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶的活性高,而纤维素酶活性则没有明显的规律。     

应用UP-PCR进行瓜类保护地土壤镰孢菌多样性分析

采用Universally Primed PCR（UP-PCR）技术对分离自辽宁省瓜类作物保护地土壤中的25株镰孢菌菌株和3株对照镰孢菌菌株进行了遗传多样性分析。筛选出6个扩增多态性好且稳定的通用引物，共扩增出73条带，其中多态性条带66条，占总条带数的90.4 %。当相似系数为0.736时，可将28株镰孢菌菌株划分为8个类群，其中14株尖孢镰孢菌菌株聚为一个类群。     

木霉菌REMI转化体诱导番茄植株产生防御酶系的研究

对不同木霉菌REMI转化体诱导番茄产生的PAL、POD、CAT和SOD防御酶系进行了研究.结果表明:Ttrm55处理番茄植株产生的酶活性与其它菌株有所不同, PAL、POD和CAT的变化趋势明显不同于其它菌株;SOD与其它菌株的变化趋势一致,但SOD酶活性高于其它菌株.Ttrm31处理番茄植株产生的各种防御酶系的变化趋势与其它菌株的基本一致,但CAT、PAL活性高于其它菌株;而SOD、POD活性稍低.Ttrm34处理番茄植株产生的防御酶系中POD、PAL活性稍高;而其它酶活性稍低.     

荠菜无菌快速繁殖技术的研究

荠菜(Capsella bursa-pastoris),十字花科一年生草本植物,嫩株可作为蔬菜,既有食用价值,又有一定的药用功效。以荠菜种子为外植体进行无菌培养,获得了再生植株,并建立起快速繁殖无性系。荠菜芽分化增殖最适培养基为:MS 6-BA3.0mg/L NAA0.5mg/L,分化频率达到89.1%,增殖系数达到3.45,平均苗高达2.4cm;生根最适培养基为:1/2MS NAA0.05mg/L,生根数为4～6条,生根率达到100%。     

沈阳地区桑树硬枝扦插的初步研究

采用塑料袋扦插的方法,对沈阳地区现行的铁耙、育8号和菠萝3个桑树品种的扦插成活率及生根剂对其扦插的影响进行了研究.结果表明:桑树不同品种的扦插发芽、生根情况不同,同时扦插成活率也存在一定差异,以菠萝桑扦插效果最好;同一桑树品种,枝条不同部位,扦插效果也不同,以基段扦插效果较好;生根剂处理,可明显提高扦插成活率.