山东省寄生烟草的孢囊线虫种类鉴定及种内群体间rDNA-ITS-RFLP分析

 在山东省5个植烟县/市采集烟草线虫土壤样本24份,其中10份土样中分离到孢囊线虫的孢囊,对之进行系统的形态学观测。孢囊阴门锥突出,双半膜孔,下桥和泡囊发达,阴门裂长（44.1±3.5） μm,阴门窗长（50.4±4.8） μm、宽（36.6±4.1） μm,下桥长（83.8±4.7） μm、宽（11.0±0.9） μm。利用大豆孢囊线虫特异性引物对分离到的孢囊线虫群体进行了分子鉴定。形态学和分子鉴定结果表明,山东省寄生烟草的孢囊线虫为大豆孢囊线虫Heterodera glycines Ichinohe,1952。对这10个孢囊线虫群体rDNA-ITS区进行了PCR扩增产物用7种限制性内切酶进行酶切和测序比对。发现,所有孢囊线虫群体均能扩增出一条大约1 000 bp大小的片段;用Alu Ⅰ、Bsh 1236 Ⅰ、Hae Ⅲ、Hha Ⅰ 、Mva Ⅰ 、Rsa Ⅰ酶切后,产生的酶切表型均相同;用Ava I酶切后,产生了2种酶切表型。所测孢囊线虫群体与GenBank收录的大豆孢囊线虫序列相似度高达99%以上。     

山东省烟草孢囊线虫的群体动态和世代发生特点

为探究烟草孢囊线虫Heterodera glycines的田间侵染循环特点,2012年从山东省诸城市某烟田定点定期取样,对土壤和根组织中的线虫进行分离和染色后镜检并计数。结果显示,4月29日至9月9日在土壤中均检出烟草孢囊线虫2龄幼虫（J2）,有4个发生高峰,最大密度在7月9日,为7.3条/100 g土壤。5月13日至8月13日在根组织中出现J2,有3个明显高峰,最大密度在7月15日,为30条/10 g根;年轻雌虫在5月21日至8月30日形成,有3个明显高峰,最大密度在7月2日,为54条/10 g根。研究表明,烟草孢囊线虫 1年发生4代,平均世代历期27 d;后两代存在明显世代重叠现象;第4代线虫侵染量很少,且根内线虫发育不良。