昆虫病原线虫防控苹果蠹蛾的影响因素

苹果蠹蛾（Cydia pomonella L.）是一种重要的世界性害虫,目前已在我国9个省（自治区、直辖市）发现,对我国苹果、梨等果树产业构成了严重威胁。目前,化学防治仍是防控苹果蠹蛾的主要措施,化学农药大量使用导致农药残留严重超标,影响果实品质及人类健康,因此研发新的生防制品具有重要意义。昆虫病原线虫具有主动寻找寄主害虫的能力,具有生物防治苹果蠹蛾越冬幼虫的应用潜能。本文从防控苹果蠹蛾的昆虫病原线虫高效品系以及影响其防控效果的因子（温度、湿度、紫外线等）进行了综述,以期为田间有效利用昆虫病原线虫防控苹果蠹蛾提供参考。     

昆虫病原线虫JLSY 003的鉴定及其生物学特性测定

经28S rDNA和ITS序列分析,从吉林省松原市土样中分离到的昆虫病原线虫JLSY 003为Oscheius myriophila品系。本研究以大蜡螟末龄幼虫为寄主,测定该线虫的生物学特性。结果表明,JLSY 003浓度为80 IJs/larva时具有较高的侵染力,致死中时间LT₅₀为15.409 h,侵染24、48 h时,致死中浓度LC₅₀分别为46.067、25.297 IJs/larva。JLSY 003高温耐受性强且繁殖力高,36 ℃、8 h时线虫死亡率为19.27%,产量为1.873×10⁵ IJs/larva,4.695×10⁵ IJs/g。结果表明该线虫具有较高的致病力、耐热性和繁殖力。     

枯草芽胞杆菌GB519抗菌蛋白的理化性质及生防效果

枯草芽胞杆菌GB519是从土壤中分离对稻瘟病菌具有显著抑菌活性的菌株。为了明确菌株GB519抗菌粗蛋白的理化性质，分析了光照、紫外线、温度、pH和酶（蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶）对抑菌活性的影响。结果表明，抗菌蛋白对光照、紫外线和3种酶作用稳定；40℃~100℃处理1 h抑菌活性稳定，121℃处理30 min活性仅降低了7.4%，具有较好的耐高温特性；在pH 2.0~10.0活性稳定，但pH 11.0~12.0活性有所下降，分别降低了14.9%和18.1%。抗菌蛋白对多种植物病原菌具有抑菌作用，其中对茄子菌核病菌的抑菌活性为72.7%。在温室条件下对水稻叶瘟的防效达到80.1%。因此，菌株GB519可作为防控稻瘟病生防潜力菌进行开发。     

枯草芽胞杆菌GB519在水稻植株中的定殖及对稻瘟病田间防效

枯草芽胞杆菌GB519是一株具有广谱抑菌活性的生防菌株。本研究利用绿色荧光蛋白标记的菌株GB519-GFP处理水稻种子、根和叶片,结合激光共聚焦显微镜观察和抗生素平板回收检测的方法,探究其在水稻根茎叶中的定殖动态。结果显示：经GB519-GFP发酵液处理水稻种子、根和叶片后,菌株均可内生定殖于植株的表皮、皮层和维管束中,表明其可在水稻植株内迁移和定殖。GB519-GFP在处理部位的定殖量通常呈现先减少后增多的趋势,非处理部位3～5 d后即可检测到标记菌株。浸种处理,3 d后在幼芽中可检测到标记菌株;20 d后在根中的菌量最多,达5.7×10⁵ cfu/g。灌根处理,1 d后根中菌量为5.4×10⁵ cfu/g; 20 d后根、茎和叶中菌量均达到最大值;处理80 d后,根中定殖数量仍达1.9×10⁵ cfu/g。叶面喷施处理,1 d后叶片菌量为4.2×10⁵ cfu/g; 20 d后叶片菌量达4.4×10⁵ cfu/g。不同处理方法在各部位的定殖量几乎均在处理20 d后达到峰值。...     

小杆线虫Oscheius tipulae JL1的鉴定及生物学特性

利用大蜡螟Galleriamellonella L.诱集法，从采自吉林省的土样中分离到小杆类昆虫病原线虫1种。经形态学、ITS及28S rDNA序列分析鉴定，明确了该线虫为Oscheiustipulae JL1。室内生物测定结果表明：24 h时，线虫JL1浓度为120 IJs/larva及以上时，大蜡螟的死亡率达90%以上；48 h时，浓度40 IJs/larva时，大蜡螟死亡率达93%以上；60 h时，浓度高于20 IJs/larva时，大蜡螟死亡率100%。耐热性方面，在38℃下处理8 h，线虫死亡率快速增加，35℃处理16 h，线虫死亡率开始快速增加。线虫JL1在35和38℃条件下，分别至少可耐16和8 h的高温，死亡率分别在3.2%和15.3%以下。结果表明该线虫具有较好的耐热力、侵染力和致死力，未来有望用于害虫防治。     

枯草芽胞杆菌GB519发酵液菌体数量和芽胞率检测方法的比较

为了提高枯草芽胞杆菌GB519发酵液菌体数量和芽胞率的统计效率,本研究采用平板涂布法和平板倾注法进行活菌计数,利用加热除菌法、结晶紫染色法和孔雀绿染色法开展芽胞率检测效率的比较研究。结果表明:平板涂布法与倾注法的菌体计数数量差异不大,误差率相对一致。枯草芽胞杆菌GB519利用结晶紫染色法与孔雀绿染色法检测芽胞率差异不显著。确定了枯草芽胞杆菌GB519加热除菌法菌体致死温度为80℃、时间为15 min,其芽胞量为131.9×10~8CFU/mL,芽胞率为50.1%,与孔雀绿染色法(54.8%)差异不显著,与结晶紫染色法芽胞率(58.7%)差异显著。本研究将为类似的芽胞检测研究提供方法和数据参考。     

链霉菌Snea253菌株的变异分析及对根结线虫活性影响

为明确委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)自发突变对南方根结线虫活性的影响。本研究利用继代培养法选育Snea253突变株,对形态分化及相关基因进行分析,并测其代谢产物的生物活性。获得6株菌落形态差异大的自发突变菌株,其中不产色素的3株突变菌株Snea253-G、Snea253-B和Snea253-F杀线虫活性分别为61.0%、45.5%和35.0%;产色素的3株突变株Snea253-A、Snea253-H和Snea253-J杀线虫活性分别为48.7%、37.2%和37.9%。ssgA、bldC、bldD、whiB、whiE和whiI基因克隆测序结果显示各突变株基因序列没有差异,可能此6个基因没有直接参与控制Snea253菌株的自发突变。链霉菌自发突变不但使其形态发生变异,而且也影响了其代谢产物的生物活性,研究为从形态上筛选优良菌株提供了相关理论依据。