茎瘤芥(榨菜)杂交种涪杂2号种子纯度SSR鉴定

[目的]利用SSR分子标记技术对茎瘤芥涪杂2号种子纯度进行检测,为茎瘤芥及其他杂交种纯度鉴定提供参考,也为加快涪杂2号的推广应用打下基础.[方法]以茎瘤芥杂交种涪杂2号、父母本及易混杂植株为试验材料,应用SSR分子标记技术结合改良CTAB法快速提取DNA,进行特异引物筛选及验证,对涪杂2号种子纯度进行快速检测,并对检测结果进行田间表型鉴定.[结果]从80对SSR特异引物中筛选出6对特异性强的引物,其中引物Na14-G06能清晰地扩增出父、母本的特异性条带,并且双亲互补,该引物同时可将杂交种中的异源花粉植株分离出,其余5对引物可将机械混杂植株区分开;两对引物联用Na 14-G06+O11 1-H02、Na 14-G06+Na 14-G 10或Na14-G06+O112-D09能较好区分假杂株.利用所筛选引物对涪杂2号杂交种群体进行SSR检测,检测结果显示种子纯度为95.8%,与田间生物学表现性状检测结果(96.7%)基本一致.[结论]两对引物联用可用于涪杂2号杂交一代种子纯度的快速检测和准确鉴定,SSR分子标记技术应用于茎瘤芥杂交种子纯度检测具有可行性.     

航天诱变对芥菜生理生化特性的影响

以“实践八号”育种卫星搭载后SP5代芥菜变异选系的叶片为材料,对叶片中叶绿素含量、SOD活性、POD活性以及可溶性蛋白含量进行检测,研究航天诱变对芥菜不同品种生理生化特性的影响,为下一步开展芥菜航天诱变育种奠定基础.结果显示:芥菜变异选系与对照相比生理生化特性产生了不同程度的增减变化;不同生理指标变化幅度不同,其中POD活性和叶绿素含量变化幅度较大,可溶性蛋白含量变化幅度最小;不同芥菜品种对航天诱变敏感性不同,其中棒菜S50变异选系最敏感,各指标基本达到显著或极显著水平,茎瘤芥JL209变异选系最不敏感;不同发育时期芥菜生理生化特性不同,幼苗移栽40d比80 d芥菜变异株系生理生化指标差异明显,说明生育后期各生理生化特性逐渐趋于稳定.芥菜;航天诱变;叶绿素含量;SOD活性;POD活性;可溶性蛋白含量;生理生化特性     

玉米Ubi-1启动子驱动挪威鼠热激蛋白4基因（Hspa4）植物表达载体的构建

挪威鼠热激70 kD蛋白4(Rattus norvegicus heat shock protein 4,Hspa4)是哺乳动物细胞内重要的一种分子伴侣,通过参与热激响应、未折叠蛋白应答等来保护机体免受损伤,在适应外界应答时是一种关键性的蛋白质(Kang et al.,2002;Zhao et al.,2007),有阻止蛋白质变性的功能.本研究选用在单子叶植物中活性极强的玉米Ubi-1启动子,构建了可持续、高效表达挪威鼠Hspa4基因的组成型单子叶植物表达载体pCAMBIA1301-Ubi-Hspa4(p13UH),为利用Hspa4提高植物的抗逆性提供资料.     

茎瘤芥(榨菜)新品种渝直80的选育

渝直80是以茎瘤芥与甘蓝型油菜天然远缘杂交株为材料,利用优良自交系郫县榨菜连续回交7代以上再自交,创制的茎瘤芥稳定新品系。该品种中早熟,株型直立紧凑,耐密植,瘤茎扁圆形、肉瘤钝圆,皮色淡绿,间沟浅,平均单个瘤茎鲜质量500~600 g,茎叶比1.3~1.6,皮薄筋少,耐空心,粗蛋白含量(以干基计)33.29%,含水量低,脱水速度快,鲜食加工均可,加工成菜率和品质与永安小叶相当,宜直播栽培,667 m²种植6000~7000株;育苗移栽8000~9000株/667 m²,一般产量3000~3500 kg/667 m²,高产可达4000 kg/667 m²。可在重庆市榨菜主产区海拔500 m以下主要作榨菜加工原料栽培。     

冬茎瘤芥(榨菜)新品种涪杂8号的选育

晚熟丰产型冬茎瘤芥一代杂种涪杂8号,是利用自育茎瘤芥胞质雄性不育系96145-1A和优良父本203配组选育而成。该品种最显著的特点是抗抽薹能力强,播期弹性大,叶片较直立,比对照永安小叶耐病毒病(Tu MV),瘤茎产量高,丰产性好。一般每667 m~2瘤茎产量3 500~4 000 kg,高产田块可达4 500 kg以上。适宜重庆市海拔600 m以上茎瘤芥产区作二季榨菜栽培及重庆、四川、湖南、云南、贵州等地作为榨菜加工原料栽培。     

玉米Ubi-1启动子驱动挪威鼠Hspa4基因植物表达载体的构建

根据Genbank中挪威鼠（Rattus norvegicus）Hspa4基因序列(登录号：NM 153629)和玉米Ubi-1启动子序列(登录号：DQ141598 )设计引物,采用RT-PCR和PCR技术分别进行克隆。测序及同源性分析结果表明：Hspa4基因片段含有2530bp,编码840个氨基酸;获得的启动子Ubi-1序列大小为1992bp;克隆的序列与相应原序列同源性分别为99.96％和99.55%。以植物表达载体pCAMBIA1301质粒为基础,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-Ubi-Hspa4,为利用Hspa4基因改良植物抗逆性打下了基础。     

芥菜航天诱变选育后代的酯酶同工酶与SSR分析

以"实践八号"育种卫星搭载的5个芥菜品种为材料,经连续5年种植选择,共获得10个相对稳定的突变系,这些突变系农艺性状和经济性状都产生明显变异。以未经航天诱变处理的相应芥菜品种为对照,对其进行酯酶同工酶和SSR分析。同工酶分析显示:突变系与其对照之间在酶带种类及酶活性上均存在不同程度的差异;不同芥菜品种酯酶图谱不同,其诱变后代酶谱表达也不同,表明不同芥菜品种对航天诱变的敏感性存在差异。SSR分析结果表明:航天诱变材料相对于对照在SSR位点处发生较大程度的变异,其变异频率在9.52%～57.14%之间,总平均变异频率为26.19%;其中扩增片段数目变化约占56.36%,扩增片段分子量变化约占43.64%。本研究结果显示10个突变系在表现型、基因组序列和基因表达水平上均发生明显变化,表明航天诱变可作为芥菜种质资源创新和品种选育的方法之一。