新西兰兔SOD1基因的分泌型原核表达载体构建及在E.coli表达

为了研究新西兰兔SOD1蛋白分子的结构与功能,设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆得到了该基因编码序列。将该编码序列克隆到分泌型原核表达载体PET-25b,经菌落PCR、双酶切和测序鉴定证实成功构建了重组表达载体。将重组质粒转化大肠杆菌表达菌株E.coli BL21(de3) PlysS,建立了分泌型原核表达系统。IPTG诱导培养重组菌后收集样品检测,经SDS-PAGE、Western blot鉴定,证实在培养物上清中检测到了SOD1蛋白的表达。至此,成功建立了新西兰兔SOD1基因的分泌型原核表达系统,实现了蛋白的可溶表达,为进一步研究该蛋白的结构与功能打下了基础。     

新西兰白兔SOD1基因编码区克隆及生物信息学分析

试验旨在克隆新西兰白兔SOD1基因CDS区并对其进行生物信息学分析。根据GenBank中穴兔SOD1基因序列(登录号:NM_001082627.2)设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增并克隆新西兰白兔SOD1基因完整的CDS区序列,测序鉴定后与其他物种进行同源性比对并构建系统进化树,使用SOPMA、SWISS-MODEL、ExPASy、ProtParam等软件和在线工具对蛋白序列进行分析,并预测蛋白分子的亚细胞定位及互作网络。结果显示,新西兰白兔SOD1基因CDS区长度为459 bp,A、T、C、G碱基含量分别为24.84%、18.95%、23.09%和33.12%,GC含量大于AT含量,编码153个氨基酸。同源性比对结果发现,新西兰白兔与穴兔、卷尾猴、人、黑猩猩、普通狨、骆驼、家犬、猕猴、野猪、小鼠的同源性分别为99.8%、85.2%、85.0%、84.7%、84.1%、83.9%、83.9%、83.7%、83.2%和81.3%。系统进化树结果显示,新西兰白兔和穴兔进化关系最近,并单独聚成一个分支。新西兰白兔SOD1蛋白分子质量为15.7 ku,理论等电点(pI)为5.86,分子式为C_(672)H_(1084)N_(200)O_(221)S_5,不稳定指数为23.79,脂肪系数为78.89,平均亲水指数(GRAVY)为-0.276;属水溶性蛋白,无信号肽及跨膜区。SOD1蛋白包含5个潜在的磷酸化修饰位点和3个潜在的糖基化位点;在45-120位氨基酸处存在1个保守的活性中心;二级结构以无规则卷曲为主,占53.59%;三级结构建模显示蛋白易形成同源二聚体。亚细胞定位结果显示,细胞质、细胞核和线粒体分别占65.2%、26.1%和8.7%;SOD1蛋白在体内能与SOD2、PRDX1、PRDX3、PRDX4、DERL1等分子形成互作网络。本试验结果为进一步深入研究SOD1基因的功能及探索其与相关疾病的关系提供了参考依据。     

6株副猪嗜血杆菌基因组DNA的PCR指纹图谱研究

根据肠道菌基因闻重复一致序列，设计了一对特异性引物，采用ERIC-PCR和RAPD技术，研究了副猪嗜血杆菌6个分离菌株的指纹图谱和DNA多态性。结果表明，6个分离株的PCR指纹图谱与15个标准血清型指纹图谱相比较可分辨出4种血清型；6个分离株的RAPD研究结果均表现出多态性。有意义的是，6个菌株的多态性DNA片段也能明显将其分为4种类型的副猪嗜血杆菌，与特异性引物PCR结果相一致。该研究可作为流行病学调查和该菌的分子分型快速诊断方法的基础。     

宜章县脐橙产业的发展现状及对策

宜章县地处湘南位于“赣南一湘南一桂北”脐橙优势产业带,是湖南省8个脐橙优势产业开发县之一。在市县两级政府的扶持下,宜章县脐橙产业已经初具规模,但仍面临着效益低、科技投入少、产品竞争力弱等亟待解决的问题。     

新西兰白兔SOD1基因编码区克隆及生物信息学分析

试验旨在克隆新西兰白兔SOD1基因CDS区并对其进行生物信息学分析。根据GenBank中穴兔SOD1基因序列（登录号：NM_001082627.2）设计特异性引物，利用RT-PCR技术扩增并克隆新西兰白兔SOD1基因完整的CDS区序列，测序鉴定后与其他物种进行同源性比对并构建系统进化树，使用SOPMA、SWISS-MODEL、ExPASy、ProtParam等软件和在线工具对蛋白序列进行分析，并预测蛋白分子的亚细胞定位及互作网络。结果显示，新西兰白兔SOD1基因CDS区长度为459 bp，A、T、C、G碱基含量分别为24.84%、18.95%、23.09%和33.12%，GC含量大于AT含量，编码153个氨基酸。同源性比对结果发现，新西兰白兔与穴兔、卷尾猴、人、黑猩猩、普通狨、骆驼、家犬、猕猴、野猪、小鼠的同源性分别为99.8%、85.2%、85.0%、84.7%、84.1%、83.9%、83.9%、83.7%、83.2%和81.3%。系统进化树结果显示，新西兰白兔和穴兔进化关系最近，并单独聚成一个分支。新西兰白兔SOD1蛋白分子质量为15.7 ku，理论等电点（pI）为5.86，分子式为C₆₇₂H₁₀₈₄N₂₀₀O₂₂₁S₅，不稳定指数为23.79，脂肪系数为78.89，平均亲水指数（GRAVY）为-0.276；属水溶性蛋白，无信号肽及跨膜区。SOD1蛋白包含5个潜在的磷酸化修饰位点和3个潜在的糖基化位点；在45-120位氨基酸处存在1个保守的活性中心；二级结构以无规则卷曲为主，占53.59%；三级结构建模显示蛋白易形成同源二聚体。亚细胞定位结果显示，细胞质、细胞核和线粒体分别占65.2%、26.1%和8.7%；SOD1蛋白在体内能与SOD2、PRDX1、PRDX3、PRDX4、DERL1等分子形成互作网络。本试验结果为进一步深入研究SOD1基因的功能及探索其与相关疾病的关系提供了参考依据。     

宜章县脐橙产业的发展现状及对策

宜章县地处湘南位于"赣南—湘南—桂北"脐橙优势产业带,是湖南省8个脐橙优势产业开发县之一。在市县两级政府的扶持下,宜章县脐橙产业已经初具规模,但仍面临着效益低、科技投入少、产品竞争力弱等亟待解决的问题。     

柑橘溃疡病田间药剂防治试验初报

柑橘溃疡病是一种国际性检疫性病害,严重制约了脐橙的发展。溃疡病的发生降低了果实品质和产量,也影响果实外观,降低了果农的经济效益。为了有效的控制溃疡病的发生,进行了溃疡病药剂防治试验,筛选出了能有效防治溃疡病的药剂,提高了柑橘溃疡病防治效果。