苹果PGIP基因部分家族成员启动子的克隆与功能分析

根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物,克隆了苹果（Malus × domestica Borkh.）品种‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP家族基因PGIP1和PGIP2的启动子片段,序列分析结果表明PGIP1与PGIP2启动子序列相似度为71%,‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’的PGIP1、PGIP2启动子相似度都达到了99%。两个品种PGIP1启动子中TATA-box和CAAT-box的数量明显多于PGIP2,PGIP1和PGIP2启动子分别存在茉莉酸甲酯和水杨酸响应元件,暗示PGIP1和PGIP2存在不同的抗病响应途径。构建了启动子︰︰GUS融合表达载体,通过对农杆菌介导法转化烟草叶片中的GUS活性分析,比较了不同启动子的活性。结果表明：PGIP1启动子活性在品种间差异不显著;PGIP2启动子活性在品种间差异显著,‘秦冠’是‘太平洋玫瑰’的2.37倍,可能与品种抗病性差异有关;同一品种中PGIP1启动子活性显著高于PGIP2。     

SA诱导对苹果叶片中PGIP基因表达的影响

以抗病性不同的两个苹果品种秦冠和礼泉短富为材料，研究在叶面喷施不同浓度的SA对苹果叶片中PGIP基因表达水平的影响。结果表明，0.1和0.01 mmol/L的SA叶面喷施处理对苹果叶片PGIP基因表达在0~96 h、0~129 d均有影响。在SA诱导处理后0~96 h内，两种浓度的SA处理均可以促进秦冠叶片PGIP基因的表达，低浓度处理后，PGIP基因表达上调达到峰值的时间较长，峰值较高；高浓度的SA处理能提高礼泉短富叶片PGIP基因的表达水平，低浓度的SA处理抑制其表达。在SA诱导处理后0~129 d内，前期（13~27 d）秦冠叶片PGIP基因的表达维持在较高水平且低浓度SA处理促进效应大，后期（27~129 d）表达量下降，促进效应不明显；高浓度的SA处理促进礼泉短富叶片PGIP基因表达，处理后第40天达到峰值，而低浓度的SA处理抑制其表达。