利用茶树菇菌渣提取真菌多糖的方法研究

以茶树菇菌渣为提取原料,探索了"超声波辅助热水浸提法"提取真菌多糖的可行性,并优化了该提取工艺的主要差数。结果表明,出菇1～3次的菌渣多糖含量高达56.34～63.51 mg/g,得率高达17.95%～18.83%。水提法工艺中,料液比、料液初始pH、超声波处理时间和提取温度对茶树菇菌渣真菌多糖得率有显著影响,适宜的差数值为∶料液比=1∶60、初始pH 8.0、20 W超声仪超波处理20 min、提取温度90℃。在此优化差数下水提法茶树菇菌渣的多糖得率在22.63%～24.62%,显著高于差数优化前的得率。     

长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用

为了阐明烟草赤星病(tobacco brown-spot disease)病原真菌长柄链格孢(Alternaria longipes)对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的分子机制,以不同抗性水平的长柄链格孢菌株为实验材料,通过基因钓鱼(Gene Fishing)技术进行基因差异表达分析;并利用基因敲除技术对已克隆到的AlCyP1基因进行功能分析.结果表明:一个亲环蛋白基因AlCyP1的表达量在不同抗性水平的长柄链格孢中存在明显差异;应用DNA步移(DNA walking)方法克隆得到AlCyP1基因的DNA序列,其开放阅读框中存在2个翻译起始密码子,可以编码产生2种不同长度的多肽,长、短多肽产物分别具有222和188个氨基酸,其中短多肽起始于长多肽的第35个密码子;另外,氨基酸序列同源性分析发现,AlCyP1和其他真菌的亲环蛋白具有很高的同源性,达50.0%～61.3%;利用基因敲除技术对AlCyP1基因进行功能分析发现,该基因通过表达水平的改变参与了长柄链格孢对渗透胁迫的适应调节过程.