固相萃取-亲水作用色谱法测定香菇中硫杂脯氨酸

通过对色谱条件和样品前处理方法进行优化,建立固相萃取—亲水作用色谱法测定香菇(Lentinula edodes)中硫杂脯氨酸的检测方法。优化后的色谱条件为：Inertsil HILIC 亲水作用色谱柱(4.6×250 mm,5μm)对样品进行分离测定,流动相采用乙腈-0.1%磷酸水(85∶15,v/v)等度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长193 nm,柱温30℃。前处理方法为：香菇样品采用甲醇-水(70∶30,v/v)提取,MAX阴离子固相萃取小柱进行净化处理,甲醇-1.0%甲酸(90∶10,v/v)作为洗脱剂对目标物进行洗脱。检测结果表明,硫杂脯氨酸在2~100μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,加标回收率为96.3%~101.7%,相对标准偏差在1.3%~4.8%之间,检出限为0.76μg/g,定量限为2.31μg/g。该方法回收率高、简单、快速、无需衍生化,适用于香菇子实体硫杂脯氨酸的定量检测分析。     

洞庭湖区“两型农业”建设的生态经济学思考

分析了"两型农业"的生态经济学内涵,指出将洞庭湖区"两型农业"置于生态经济理论框架之中,通过强化洞庭湖区农业生态经济意识,提升洞庭湖区农业生态经济效益,构建洞庭湖区农业生态经济管理体系和湖区农业生态经济评估体系,洞庭湖区农业能够走上实现生态与经济双效益的"两型农业"发展路径。     

金针菇小G蛋白Ran的序列特征与表达分析

基于金针菇(Flammulina velutipes)基因组和转录组数据,运用本地BLAST方法,找到一个小G蛋白Ran的编码基因,命名为FvRan1。运用生物信息学方法进行分析,结果显示:该基因全长为1337bp,编码区长度为1079bp,包含7个外显子和6个内含子,其中4个内含子(I1、I2、I3、I6)在mRNA加工过程中存在可变剪切现象。通过氨基酸序列同源比对和系统发育分析发现,FvRan1具有5个G-Box保守结构域和2个效应器开关,与担子菌中Moniliophthora roreri以及Trametes versicolor的亲缘关系最近。采用RT-qPCR研究FvRan1在不同生长时期及部位、伸长期菌柄的不同部位以及竖直、微重力(旋转)、水平3个不同处理条件下的表达量,结果表明,FvRan1在成熟期菌柄中的表达量最高;在金针菇伸长区段的表达量显著高于生长点和非伸长区段;在模拟微重力条件下,FvRan1呈显著上调表达。FvRan1基因在金针菇菌柄伸长与重力应答过程中可能具有正调控作用。     

草菇谷胱甘肽过氧化物酶编码基因vv-gpx01的序列特征及表达分析

依托草菇基因组及转录组数据,克隆得到1个谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)编码基因,命名为vvgpx01。ZOOM软件的分析结果表明:该基因全长1 313 bp,含有4个外显子、3个内含子,编码228个氨基酸;5'端非翻译区长为12 bp,3'端非翻译区为452 bp;其中3个内含子在RNA加工过程中均存在保留现象。生物信息学分析结果表明:草菇的GPx01序列具备完整的谷胱甘肽过氧化物酶保守结构域;系统发育树显示,担子菌与子囊菌的GPx分别聚在了2个不同的分支上,草菇GPx01与双孢蘑菇亲缘关系较近并与其他伞菌目的真菌聚在1个分支上。另外,由内含子保留所产生的氨基酸序列均出现了不同程度的功能域缺失,这将导致谷胱甘肽过氧化物酶的失活。表达谱分析结果表明:vv-gpx01在整个草菇生长阶段都有表达,但表达量存在差异。推测,草菇GPx01可能通过可变剪接产生不同的转录本,通过调节不同转录本的表达水平来调控基因功能域的翻译水平及空间构型,最终实现酶活性的调节。     

银耳白霉病病原菌的分离鉴定及其生物学特性

2017年在福建省三明市尤溪县的一个菇房内发现了银耳白霉病.通过组织分离的方法分离了该白霉病的病原菌,并按照科赫氏法则确认了所分离的病原菌为致病菌.通过对该病原菌rDNA-ITS序列进行分析、在NCBI上进行比对,并通过MEGA 5.0软件采用最大似然法构建系统发育树,确定该病原物属于黑粉菌属(Melanotaenium).对该病原菌生物学特性的研究结果表明:病原菌菌丝在15～30℃均可生长,最适生长温度为25℃;病原菌菌丝在pH 4.5～10.0内均能生长,最适pH值为4.5;病原菌菌丝可利用多种氮源和碳源,其中对氮源硝酸钠和碳源淀粉的利用率最高.     

草菇钙调磷酸酶催化亚基(Vv-CNA)的序列与表达

[目的]分析草菇钙调磷酸酶催化亚基(Vv-CNA)的序列与表达,为进一步探究草菇生长发育及子实体开伞分子调控机理提供参考.[方法]通过生物信息学分析确定Vv-CNA基因的组成及保守结构,将ORF Finder预测的草菇CNA氨基酸序列与从NCBI下载的其他真菌CNA氨基酸序列进行比对,并通过荧光定量PCR检测Vv-CNA基因在草菇不同生长时期的相对表达量.[结果]Vv-CNA基因编码区为2503 bp,包含10个内含子(其中I2、I8、I9和I10存在内含子保留现象),编码610个氨基酸,GenBank登录号KX463514.将Vv-CNA氨基酸序列与动物(人、小鼠)、植物(拟南芥、水稻)和真菌(曲霉、酵母等)的CNA氨基酸序列进行同源比对分析,结果发现Vv-CNA蛋白有3个最保守的结构域,与密褐褶菌(Gloeophyllum trabeum)的亲缘关系最近.Vv-CNA基因在草菇子实体的蛋形期和伸长期高表达,以蛋形期的相对表达量最高.[结论]Vv-CNA基因编码钙调磷酸酶催化亚基,其高表达有利于草菇菌柄的伸长.     

洞庭湖区村落经济转型的历史考察

诸多关乎洞庭湖区村落经济转型的问题需要我们对洞庭湖区村落经济转型的历史脉络进行考察,通过追溯湖区村落经济变迁史,梳理出洞庭湖区村落经济的发展轨迹,判断出洞庭湖区村落经济转型的未来走向。本文从洞庭湖村落经济转型的历史考察中探寻洞庭湖区村落经济转型的原点,从纵向的村落经济发展线索中分析影响因素在洞庭湖区村落经济转型过程中的作用机理问题,探索出当代洞庭湖区村落经济转型发展的路径与方向,进而提出加速洞庭湖区村落经济转型发展的相关建议。     

高等农业教育与农村文化生态建设之关系

农村文化生态是指以古老的农耕生产方式孕育的农业文明所体现出来的农村人（农民）的生存状态，是融合了农村人自觉生态智慧的自我构建和社会构建过程。在工业化和市场化大潮的强烈冲击下，我国农村文化生态正面临着严重的危机，农村文化生态面临保护、发展、重构的考验。高等农业教育作为一种文化现象具有选择、传递、批判和创造的文化功能，可以给农村文化生态建设以人才支持和科研支撑。同时，农村文化生态建设也为高等农业教育提供了实践平台和发展空间，两者具有互惠共生关系。     

草菇核不对称分裂与菌种退化的相关性

[目的]探讨草菇细胞核不对称分裂与菌种退化的相关性,揭示草菇菌种退化机理.[方法]根据草菇菌落形态观察并结合RAPD技术筛选出退化的草菇菌株,通过细胞核DAPI染色,观察其细胞核大小、数目,比较正常菌株与退化菌株细胞核的异同.[结果]草菇菌丝细胞为多核,在有丝分裂过程中存在核不对称分裂.退化菌株细胞中形成染色体的数量不同,同一个细胞中可观察到大小不一的细胞核;正常菌株PY与3个退化菌株PYb5、PYb6、PYb7平均每个菌丝细胞的细胞核数目分别为12.78、10.06、8.88和7.26个,不对称分裂核分别占总核数的2.5％、10.5％、15.3％和23.7％.[结论]草菇细胞核不对称分裂可能是引起草菇菌种退化的一个重要因素.     

草菇生物学特性与农艺性状相关性分析

观察记录了36株可正常结实草菇(Volvariella volvacea)的厚垣孢子出现时间、菌落形态、菌丝长势以及菌丝细胞核个数等特性,并应用SPSS生物统计软件将其与出菇时的9个农艺性状进行相关性分析.结果表明:菌落形态与高稳系数呈显著正相关;菌丝长势与现原基时间呈显著负相关,与高稳系数和菇体颜色呈显著正相关;菌丝的细胞核个数与子实体破膜时间呈显著正相关.