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用发酵罐制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液培养条件的优化 总被引:5,自引:0,他引:5
本试验探讨了用发酵罐培养嗜水气单胞菌灭活疫苗生产菌株J-1株菌液的最佳条件。分别以发酵罐和摇床在不同的培养条件下培养J-1株制备菌液,前者12个批次,后者6个批次。比较不同的培养条件对细菌菌体数量及HEC毒素产量的影响。结果表明:发酵罐培养优于摇床培养,以产毒素培养基于28℃发酵罐通气培养J-1株,培养28小时效果最佳,培养菌液含菌量达2.9×1010cfu/ml,培养液上清的溶血价达27,发酵液中残糖为0.12g/L,符合发酵工艺要求。 相似文献
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迟缓爱德华氏菌检验程序的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
本试验研究了迟缓德华氏菌(Edwardsiellatrada,Et)的细菌学及致病因子检测,确定了相应检测指标,制定了检验程序。对不同来源的Et作分离及生化鉴定,确定10项生化鉴定指标。用三种方法即平板法(PlateAssay,PA)、接触法(ContactHemolysis,CH)和上清法(SunernatantAs-say,SA)检测Et溶血素,阳性率依次为75%、75%、57.14%。28株Et中,18/26的胞外产物(Extra-cellularProducts,ECP)对HEP-2细胞有细胞毒性,17/28菌株有侵袭力。用ATCC15947株ECP的抗血清进行Det-ELISA,检测阳性率为19/26(73.08%)。 相似文献
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家养鲤科鱼暴发性传染病的病原研究 总被引:37,自引:6,他引:37
从不同地区、不同鱼种的濒死病鱼的实质性脏器中分离到一种革兰氏阴性、有运动力的短杆菌,具有如下特点:氧化酶和V-P反应均呈阳性,发酵葡萄糖产酸、产气,发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖,不发酵肌醇,鸟氨酸脱羧酶阴性,对新生霉素不敏感。用API-20E系统试剂盒检测,证实其为嗜水气单胞菌。用该菌人工感染健康鱼,可引致与自然发病鱼类似的病症,其半数致死量(LD_(50))为5×10~3个菌。在该菌的培养上清中存在着一种具有溶血活性的毒素。研究证明,家养鲤科鱼暴发性传染病的病原为产毒素的嗜水气单胞菌,该病的准确名称应为嗜水气单胞菌败血症。 相似文献
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嗜水气单胞菌苗预防白鲫暴发性传染病的田间试验 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对田间大规模使用嗜水气单胞菌苗预防淡水鱼暴发性传染病进行了初步研究。选取患病死亡最为严重的白鲫为对象,采用腹腔注射和浸泡两种免疫方法,对精养鱼池放养的1万3千余尾白鲫进行免疫接种,所用疫苗为自行研制的嗜水气单胞菌苗。结果表明:在暴发性传染病自然流行的情况下,免疫接种组的发病死亡率为10.8%,未免疫接种的平行对照组发病死亡率为16.4%,两者间的差异极显著(P<0.01);在免疫接种组中,浸泡免疫组的发病死亡率为10.4%,腹腔注射免疫组的发病死亡率为11%。两者间的差异不显著(P>0.05),由此可见,应用嗜水气单胞菌苗进行免疫接种,可有效地预防淡水鱼的暴发性传染病。浸泡免疫的成功为该苗的进一步推广展示了广阔的前景。 相似文献
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本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病料,均为阴性反应,仅与豚鼠气单胞菌、杀鲑气单胞菌新亚种及吕克氏耶尔森氏菌有轻度的交叉反应。对72株病鱼分离菌及33份病鱼组织的检测结果表明,点酶法与溶血试验的符合率分别为80.7%和90.9%。以上试验重复3次,结果完全一致。综上可见,用点酶法检测嗜水气单胞菌HEC毒素,无须作复杂的细菌鉴定,并能直接用于病料,是一个快速、敏感、特异、有效的方法,显示出广阔的应用前景。 相似文献
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嗜水气单胞菌HEC毒素基因的克隆及酶谱分析 总被引:4,自引:0,他引:4
嗜水气单胞菌HEC毒素是该菌重要的致病因子和保护性抗原。为了解其分子生物学特性,用SDS-蛋白酶K法提取了嗜水气单胞菌J-1株的染色体,经EcoRI酶切、琼脂糖凝胶电泳后作Southernblotting,用DIG标记的HEC毒素探针检测,其5.0kb的酶切片段呈阳性。回收该片段,与pUC19相连,转化大肠杆菌JM109。提取X-gal平板上白色菌落的质粒,经大小比较、EcoRI酶切分析及DIG标记HEC毒素核酸探针斑点杂交鉴定,获得pHEC11等含5.0kb目的DNA片段的重组质粒。pHEC11质粒经酶切、电泳,证实目的DNA片段中含有BamHI、SmaⅠ、PstⅠ及PvuⅡ等酶切位点,并绘制了其物理图谱。同时还构建了若干亚克隆,为研制嗜水气单胞菌基因工程苗提供了目的基因片段。 相似文献