差异表达基因分离技术及其在家禽研究中的应用

随着分子生物学技术的发展以及基因组计划的实施,差异表达基因的分离与克隆已成为近年来研究的热点.通过对不同生命活动中各种相关基因进行筛选和研究,能够使我们更好地了解这些生命活动的分子作用机制.本文就近年来比较常用的差异表达基因分离技术及其在家禽研究中应用的进展进行综述.     

慢性饮酒对小鼠卵巢功能及其对eCG反应性的影响

为研究酒精对哺乳动物卵巢的生殖毒性作用,利用未成熟雌性小鼠进行了酒精的生殖毒性研究。试验选用24只21日龄断奶未成熟小鼠,随机均分为3组,试验组Ⅰ自由饮用啤酒,试验组Ⅱ饮用稀释的白酒（含体积分数为5％的乙醇）,对照组饮用自来水。试验期间检查阴道开张日龄;试验5周后每组分别取4只小鼠用乙醚麻醉后测定体重、卵巢、子宫等指标;同时观察卵巢和肝脏的组织学形态;剩余12只小鼠用孕马血清促性腺激素（eCG）处理,48h后进行麻醉、称重和组织学观察。结果表明：试验组Ⅰ和Ⅱ小鼠阴道开张日龄显著推迟;eCG处理前试验组Ⅰ和Ⅱ小鼠卵巢和子宫质量与对照组相比显著增加;eCG处理后试验组Ⅰ卵巢质量与对照组相似,但试验组Ⅱ卵巢质量显著低于对照组和试验组Ⅰ,子宫与卵巢呈相似的变化;在肝脏组织形态学上也体现出了酒精的毒性作用。由此可见,慢性饮酒抑制了小鼠卵巢功能,并且对eCG反应性显著降低,表明慢性饮酒对卵巢和肝脏均有直接的毒害作用。     

鸭早期胚胎发育相关基因消减文库的构建与分析

动物胚胎发育受到多个基因的表达调控,为探索鸭早期胚胎发育的分子机制,本实验构建了鸭早期胚胎发育相关基因的消减文库,筛选与鸭早期胚胎发育相关的候选基因.采集两个不同时段的鸭(Anas platyrhynchos)胚(6和20 h)分别作为驱动组(driver)和实验组(tester),通过由双链特异性核酸酶(designatedduplexspecific nuclease,DSN)介导的消减杂交方法,构建鸭早期胚胎发育相关基因的消减文库,并进行生物信息学分析.结果表明,在构建好的文库中随机挑选216个阳性克隆进行测序,最终共得到54条有效序列,平均长度为1 084 bp.将这些序列在GenBank中进行BLAST比对,其中44条有同源基因,基因注释(geneontology,GO)显示,这些基因与代谢、建立细胞定位、生物调节等各种生物途径相关,它们在鸭早期胚胎发育过程中的不同方面(如神经系统发育、免疫调节、转录调节等)都发挥着非常重要的作用.这些差异表达基因的分离与鉴定,有助于家禽早期胚胎发育的相关研究.     

圈养大熊猫“妙音”初次发情及假孕的行为研究

选取大熊猫"妙音"发情期及假孕期各6 d,应用瞬间扫描取样法和目标取样法对大熊猫"妙音"的行为进行了研究。大熊猫"妙音"在发情期间的采食行为、活动行为和休息行为均为3种主要行为,且休息行为的时间分配明显要少于正常时期;活动行为明显要多于正常时期,假孕期采食行为和活动行为的时间分配要少于正常时期的采食行为和活动行为,而休息行为则要多于正常时期。发情期和假孕期相比,活动行为和休息行为在时间分配上差异性极其显著。发情期活动行为较多,休息行为较少;假孕期活动行为较少,休息行为较多。通过行为的变化来预判大熊猫是否发情与假孕,进而做下一步的诊断以及修改饲养管理方案,确保大熊猫的健康。