番茄·拟南芥PREs及水稻ILIs基因生物信息学分析

为进一步了解常见模式植物番茄、拟南芥PREs以及水稻ILIs共18个基因的生物信息学数据,为基因功能的研究奠定理论基础,结合NCBI等数据库,运用MG2C等工具,对上述基因结构、蛋白理化性质等生物信息学数据作出预测与分析.除OsILI6外,其余基因均只含1个内含子,且CDS序列均较短.蛋白理化性质分析表明这些蛋白质稳定性较低,二级结构分析表明α 螺旋与无规则卷曲构成蛋白质的主体部分.三维结构模拟表明这些蛋白质以二聚化的形式发挥功能,在结构上相对保守,分析数据可为后续基因功能研究提供支持.     

用ELISA检测鸡体内RAC残留的消除规律

为建立盐酸莱克多巴胺(RAC)在鸡血清和组织中残留的检测方法,探究其消除规律,本研究以1mg/kg、3mg/kg和9mg/kg的添加剂量将R AC混入饲料,连续饲喂21d,在用药后第1、3、7、14、21d和休药后1、3、7d,分别采集实验组和对照组鸡血液、肌肉、肝脏和胃组织样品,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各样品RAC含量。实验结果为实验组鸡血清中RAC残留量在第7d达到高峰,第7～14天持续下降,第21d出现第2个残留高峰;肌肉中残留量在第7d达到高峰,后逐渐降低;肝脏中比较容易达到残留高峰,第21天后,RAC残留量迅速下降;胃中残留量第14d达到高峰。用ELISA对组织和血清中残留RAC的检测发现,RAC残留浓度基本遵循肝脏胃肌肉血清,休药7d后为胃肝脏肌肉血清。     

液相色谱-质谱联用法测定鸡体内盐酸莱克多巴胺的残留

为建立盐酸莱克多巴胺(RAC)在鸡血清和组织中残留的检测方法,探究其消除规律,试验选择健康的三黄鸡80只,随机分为4组,其中对照组8只,试验组(Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组)各24只,对照组饲喂正常饲料,试验组分别以1,3,9 mg/kg的剂量将RAC添加到饲料中,连续饲喂21 d,在用药后第1,3,7,14,21天和休药后第1,3,7天分别采集试验鸡血液、肌肉、肝脏和胃组织样品,采用液相色谱-质谱联用法检测各样品中RAC含量。结果表明:各试验组鸡只血清的RAC残留量在第7天达到高峰,第14天明显下降,第21天出现第2个残留高峰;肌肉中RAC残留量在第7天达到高峰,之后逐渐降低;肝脏中3～21 d RAC残留量均在90 ng/g以上;胃中RAC残留量前14 d呈上升趋势,之后下降。休药7 d后,血清和肌肉中的RAC残留量低于检测下限,但肝脏和胃中仍可检测到残留,且胃中的残留量略高于肝脏。说明RAC易在鸡体内残留,且不同组织的残留浓度和代谢速率不同。     

鸡传染性喉气管炎病毒gG蛋白间接竞争ELISA方法的建立及初步应用

鸡传染性喉气管炎是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。为建立检测该病毒g G蛋白的间接竞争ELISA方法，本研究以原核系统表达ILTV g G蛋白，并采用切胶纯化该重组g G蛋白(rg G)后经western blot检测纯化的rg G (P-rg G)与本研究室制备的g G蛋白单克隆抗体(MAb) 3C8的反应原性。将MAb 3C8采用Protein G亲和层析柱纯化后与HRP偶联(HRP-3C8)，利用间接ELISA法测定纯化HRP-3C8的效价。结果显示，P-rg G与MAb 3C8发生了特异性反应，在30 ku处出现特异性条带。纯化的HRP-3C8效价达1∶51 200。以P-rg G作为包被抗原，以纯化的HRP-3C8作为检测抗体，通过对各反应条件优化后初步建立了ILTV g G蛋白间接竞争ELISA (ic-ELISA)检测方法。条件优化结果显示，P-rg G包被量为12.5 ng/孔，HRP-3C8抗体稀释度为1∶10 000，将待检样品与HRP-3C8抗体在37℃孵育40 min后加入ELISA板再反应20 min,TMB底物反应...