2011年我国部分地区鸡源大肠杆菌耐药性分析

鸡大肠杆菌病是指部分或全部由鸡致病性大肠埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的疾病,其抗原性复杂,血清型多样,临床症状和病理变化多变。上世纪80年代以来,随着我国养鸡业集约化程度的不断提高,鸡大肠杆菌病不断在我国各地蔓延和扩散,全国大部分省、市、自治区皆有报道。鸡大肠杆菌病除引起鸡死亡造成的直接损失外,还能导致饲料利用率、生产能力及     

不同剂量地塞米松及不同免疫调节剂对鸡免疫功能的影响

本文旨在研究不同剂量地塞米松及不同免疫调节剂对鸡免疫功能的作用,以确定临床上地塞米松的用量上限及寻找一种效果较好的免疫调节剂。将10日龄鸡随机分为对照组、0.1、0.5、1.5 mg/kg·BW地塞米松组,通过饮水添加地塞米松,检测多种免疫指标。结果表明地塞米松可影响正常鸡的免疫功能,0.1、0.5、1.5 mg/kg·BW地塞米松均可极显著抑制鸡外周血T淋巴细胞增殖（P〈0.01）,但对B淋巴细胞无明显影响;0.5、1.5 mg/kg·BW地塞米松可极显著抑制鸡白细胞介素-2的活性（P〈0.01）;0.5、1.5 mg/kg·BW地塞米松组的新城疫抗体水平显著低于对照组（P〈0.05）;0.5、1.5 mg/kg·BW地塞米松组淋巴细胞比率显著低于对照组（P〈0.05）;地塞米松组的鸡总体重、免疫器官及法氏囊指数显著低于对照组。将10日龄鸡随机分为4组,分别为对照组、干扰素组、干扰肽组和胸腺肽组,试验前5 d所有组饮水中均添加0.5 mg/kg·BW地塞米松,5 d后各组分别在饮水中添加相应的免疫调节剂,试验结束后检测免疫指标。结果表明：干扰素、胸腺肽组的T淋巴细胞转化率极显著高于对照组（P〈0.01）;胸腺肽组的新城疫抗体水平显著高于对照组（P〈0.05）,白细胞数、淋巴细胞数极显著高于对照组（P〈0.01）,总体重显著高于对照组（P〈0.05）;干扰素组的脾脏指数显著高于对照组（P〈0.05）。试验结果说明当地塞米松的用量超过0.5 mg/kg·BW可抑制鸡的免疫功能,而干扰素和胸腺肽对鸡群有免疫调节作用,可在一定程度上提高鸡群的免疫力。     

浅析一起因延误处理引起的直流异常事件

<正>1异常信号某年7月24日7时8分,某集控站后台机发出110kV甲站"直流系统母线电压异常""直流屏事故总"信号。变电运行人员未重视,延迟处理导致直流电压下降。2检查分析运行人员从光字牌上可以看出,"直流系统母线电压异常"光字牌绿闪,说明此信号发出后随即复归,而"直流屏事故总"光字牌红闪,说明此信号发出后没有复归。而从监控画面上看到直流控母电压为219 V,在正常范围内。运行人员妄下结论,判断"直流系统母线     

粪肠球菌来源内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的重组表达及催化特性

内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(endo-β-N-acetylglucosaminidase,Endo/ENGase,EC3.2.1.96)是一类特异性识别并切割N-连接聚糖核心结构中两个N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,Glc NAc)之间的β-1.4-糖苷键的糖苷酶,广泛应用于蛋白质N-糖基化分析。为表征粪肠球菌(Enterococcus faecalis)来源的内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的酶学特性,本研究通过PCR扩增粪肠球菌内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因endoEf,并通过无缝克隆的方式构建原核表达载体pET-28a-endoEf,在实现重组表达和纯化的基础上对EndoEf蛋白的催化特性及关键催化残基进行分析。结果表明,EndoEf可在大肠杆菌中以可溶形式高效表达,经钴离子亲和层析可获得高纯度的目标蛋白,每升菌液可纯化202.1 mg目标蛋白;以RNase B为底物,其比活力为1.0×10~4U/mg。EndoEf包含保守基序DXDXE,属于糖苷水解酶18(glycoside hydrolases 18,GH18)家族,可以酶切天然及变性状态下的核糖核酸酶B(ribonuclease B,RNase B)和鸡卵清蛋白(ovalbumin,Ova);基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进一步证明了EndoEf对RNase B上N-连接糖链的水解。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)显示,EndoEf表观分子量为30.2 kD。酶学性质分析表明,EndoEf最适温度为40℃,最适pH范围为5.0~7.0;在温度为40~50℃、pH 7.0~9.0之间具有较好的稳定性,可耐受1 mol/L NaCl、100 mmol/L DTT、2%SDS和2%Triton X-100。定点突变技术构建EndoEf的3个突变体D125N、D127N和E129Q,并对突变体酶活性进行分析表明,E129Q活性几乎完全丧失,D127N丧失大部分水解活性,而D125N没有明显活性改变,说明EndoEf的129位谷氨酸是催化必须氨基酸。EndoEf重组表达体系的建立和酶学性质的分析为其在糖蛋白研究中的实践应用提供了科学依据。