应用RT—PCR方法检测鸭病毒性肝炎新型和I型病毒

鸭病毒性肝炎病毒是危害养鸭业的重要病毒性传染病,主要感染低日龄雏鸭,临床上分离到的病原主要为鸭病毒性肝炎I型病毒和鸭病毒性肝炎新型病毒,为了加快本病的检测速度,尽快确诊病原,根据GeneBank上两种毒株的基因组序列,选择两种毒株的差异基因序列分别设计了一对特异性的检测引物,将两对引物放在一个PCR反应体系中,两种毒株分别进行特异性扩增,根据扩增片段的大小进行鉴别,建立了可以同时检测鸭病毒性肝炎病毒I型和新型毒株的复合RT—PCR方法,该检测方法快速,特异性强,灵敏性高,可以用于鸭病毒性肝炎病毒的分型鉴别检测。     

奥芬达唑干混悬剂对黄牛线虫的驱除试验

应用奥芬达唑干混悬剂分别按5、10、15mg／kg．bw剂量1：2服给药，驱除黄牛自然感染线虫，投药后14d粪检结果：15mg／kg剂量试验组虫卵(幼虫)转阴率、减少率均为100％；10mg／kg剂量对消化道线虫虫卵转阴率909／5，减少率99．9％，原圆科线虫幼虫转阴率909／5，减少率94．6％；5mg／kg剂量对消化道线虫虫卵转阴率80％，减少率99．2％，对原圆科线虫幼虫转阴率70％，减少率91．1％；而对照组同期检查虫卵(幼虫)给药前后无明显变化。第21d剖检结果：15mg／kg、10mg／kg、5mg／kg剂量总计驱虫率分别达99．2％、97．4％和95．7％。均达到了高效。     

鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定

根据GenBank中发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)基因序列,设计合成一对特异性引物,RT-PCR扩增966bp E基因片段并克隆至pMD18-T载体中,经鉴定正确后,将其定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组阳性质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,Western blot检测证明该重组蛋白可与抗血清发生反应。