蜜蜂全脑解剖新方法的研究

蜜蜂是研究社会行为的模式生物，其复杂的学习记忆导航能力和相对简单的脑结构为脑科学研究提供良好模型。蜜蜂脑可用于神经科学、分子科学、行为科学等研究，但由于蜜蜂脑小且柔软，而且被几丁质包裹、被腺体缠绕，导致蜜蜂全脑解剖不是初学者所能轻易掌握的。我们经过不断摸索，建立了一种蜜蜂全脑解剖的新方法，通过切开头部边缘的几丁质，用镊子夹住头部反面的几丁质并旋转，然后除去正面几丁质等步骤，在短时间内就能获得完整的蜜蜂全脑。该方法将为蜜蜂脑科学研究提供有力技术支撑。     

高效液相色谱—电化学法检测蜜蜂脑部单胺类神经递质及其酸性代谢产物含量

建立同时测定蜜蜂脑部神经物质左旋多巴(l-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱—电化学检测(HPLC-ECD)法.采用Acclaim C18色谱柱,以磷酸二氢钠、辛烷磺酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸及乙腈的混合液为流动相,流速0.2 m L·min-1,进样量10μL,柱温38℃,检测电压300 m V.蜜蜂脑组织样品经高氯酸、焦亚硫酸钠和乙二胺四乙酸混合溶液去除蛋白,再由0.22μm滤膜过滤后上样检测.结果表明:脑组织中各待测神经物质线性回归方程相关系数均大于0.997,加样回收率平均值大于90%,日内、日间精密度指数RSD平均小于5.7%.经初步研究,意大利蜜蜂脑部l-DOPA、NE、DOPAC、DA和5-HIAA的含量分别为(0.232±0.107)、(1.288±0.630)、(2.555±1.201)、(0.574±0.233)、(0.393±0.123)ng·脑-1,中华蜜蜂脑部的对应物质含量分别为(0.331±0.162)、(0.894±0.395)、(2.819±0.974)、(0.636±0.255)、(0.353±0.163)ng·脑-1.