大刺鳅促黄体生成素基因克隆及其组织表达分析

[目的]克隆大刺鳅(Mastacembelus armatus)促黄体生成素(LH)基因及明确其表达规律,为进一步阐明LH基因在大刺鳅性腺发育过程中的生理功能及揭示大刺鳅的生殖调控机理提供参考依据.[方法]采用RACE克隆大刺鳅LH基因cDNA全长序列,从GenBank中选择硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物等物种的LH氨基酸序列,通过ClustalX 2.1进行氨基酸序列比对,以MEGA 6.0中的邻接法(NJ)构建系统发育进化树,并应用实时荧光定量PCR检测分析大刺鳅LH基因在不同组织及不同性腺发育期的表达情况.[结果]大刺鳅LH基因cDNA序列全长799 bp,包括224 bp的5'非编码区(5'-UTR)、131 bp的3'非编码区(3'-UTR)和444 bp的开放阅读框(ORF),共编码147个氨基酸残基,第1~22位氨基酸残基组成其信号肽区域.大刺鳅LH氨基酸序列C-末端区域高度保守,但N-末端区域与其他硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物存在明显差异.大刺鳅LH氨基酸序列与其他鱼类的LH氨基酸序列同源性较高,其中与黄鳝(Monopterus albus)的亲缘关系最近.大刺鳅LH基因在其脑组织中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05);在卵巢、心脏、肝脏和精巢中的相对表达量次之;大刺鳅LH基因在不同发育期卵巢和精巢中的表达变化趋势一致,从II期开始其相对表达量随之增加,至V期时达峰值.[结论]大刺鳅LH氨基酸序列具有高度保守区域,其基因在各组织中广泛表达,尤其在脑组织和性腺中具有较高表达量,提示LH的靶基因可能在脑—垂体—性腺轴上,参与大刺鳅的性腺发育调控,主要促进卵母细胞和精子成熟并刺激排卵或排精.     

细粒棘球蚴GST-mu2基因的克隆、表达及重组蛋白反应原性研究

为了研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶mu 2(GST-mu 2)蛋白的反应原性,根据GenBank中Eg GST-mu2基因cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,测序验证后,将GST-mu2基因亚克隆至表达载体pET-28a中,构建pET-GST-mu2原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达蛋白进行反应原性分析。结果表明,GST-mu2cDNA全长660个核苷酸,编码219个氨基酸,该多肽含有2个N端酰基化位点,2个PKC磷酸化位点,3个CKⅡ磷酸化位点,1个TYR磷酸化位点,抗原表位区集中在28~70、147~219位;SDS-PAGE可以检测到32kDa的蛋白特异性条带;Western blot分析显示,表达的pET-GST-mu2重组蛋白能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用GST-mu2蛋白作为Eg感染诊断的候选抗原奠定了基础。     

不同种植模式下滴灌青贮玉米种植密度试验

通过探讨不同种植密度对一年两熟和两年三熟栽培模式下青贮玉米的生物产量和主要农艺性状的影响,结果表明,不同种植密度处理的青贮玉米生物产量和鲜穗重存在显著差异,随着种植密度的增加,青贮玉米的茎粗表现逐渐变细的趋势。一年两熟和两年三熟栽培模式下,复播玉米选用中早熟品种、种植密度为12万株/hm~2时的生物产量和鲜穗产量均较高;两年三熟春播玉米应选用中晚熟青贮玉米品种,种植密度以小于9万株/hm~2较为适宜。     

日粮钙水平对云南半细毛羊乳成分的影响

为研究日粮钙水平对云南半细毛羊乳成分的影响，试验选用50只云南半细毛羊妊娠后期的母羊，母羊预产期前14 d随机分为5个组（每组10只羊），分别饲喂钙水平为0.35%、0.42%、0.61%、0.75%和0.96%的试验日粮。母羊产羔后进入正试期（90 d），每30 d为1个阶段，分别为泌乳前期、中期和后期。每个阶段中间5 d，从每组选择5只母羊测定产奶量和乳成分。结果表明：（1）泌乳期各组的产奶量、羊乳的磷、能量、脂肪、蛋白、总固体、非脂乳固体含量均无显著差异（P > 0.05）。（2）乳钙含量随日粮钙水平的提高而提高，并且在泌乳前期和后期0.35%钙水平组的乳钙含量显著低于0.61%、0.75%和0.96%钙水平组（P < 0.05）。（3）泌乳中期0.61%、0.75%和0.96%钙水平组的乳糖显著高于0.35%钙水平组，分别提高3.32%（P < 0.05）、3.69%（P < 0.05）和4.43%（P < 0.01）。泌乳后期0.35%钙水平组乳糖含量最低，较0.42%、0.61%、0.75%和0.96%钙水平组分别低4.55%（P < 0.05）、8%（P < 0.01）、8%（P < 0.01）和8.70%（P < 0.01）。综上，日粮钙水平影响乳钙含量且两者成正比|在泌乳中期和后期，当日粮钙水平提高到0.61%和0.42%后可提高乳糖含量。 [关键词] 钙|云南半细毛羊|乳成分     

畜牧养殖动物疾病病因及控防对策研究

动物疾病若未采取有效的控制措施,极易导致疾病扩散,给养殖者造成巨大的经济损失。动物疾病的产生受到很多因素的影响,因此,在养殖过程中,要注重利用科学化的管理模式对动物进行管理,有利于降低疾病发生率。本文对畜牧养殖动物疾病进行了详细介绍,分析了动物疾病产生的原因,探讨了预防动物疾病产生的具体措施,有利于为今后动物疾病预防提供依据。     

论卓越人才教育培养计划与素质教育的契合

卓越人才教育培养计划是我国高等教育现有条件下的素质教育,它立足专业开展素质教育,让素质教育通过具体的培养标准渗透到专业教育的各门课程和教学环节之中,是对素质教育内容和形式的拓展和创新。厘清卓越人才培养模式改革的深刻内涵,全面贯彻素质教育思想,使卓越人才培养与素质教育有效契合,是实施卓越人才教育培养计划的关键所在。     

西藏林芝地区牛大肠杆菌的耐药性调查

本论文通过对西藏林芝地区牛大肠杆菌进行初步鉴定与药敏试验,发现西藏林芝地区牛大肠杆菌存在耐药现象,提示临床治疗以及平时预防应慎重选药,以提高牦牛养殖业的健康发展。     

新疆阿拉尔滴灌棉田栽培技术

目前，滴灌棉田的栽培技术日趋成熟，农一师棉花产量比过去有较大幅度的提高。农一师棉花面积12万公顷，单产目标子棉每公顷6573kg。一些团场部分棉田每公顷子棉突破8250kg。究其高产原因，除了土壤肥力等基础条件好，还掌握了一些田间管理中的关键点，对产量提高起到了重要作用。