富氢生理盐水干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激影响的研究

为探究富氢生理盐水(hydrogen-rich saline,HRS)干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)影响,试验选取4~6月龄、体重20~30kg的健康巴马小型猪18头,随机分为3组,每组6只,分别为假手术组、模型组和HRS干预组。假手术组仅进行翻动肝叶,维持气腹3h;模型组用腹腔镜手术建立右半肝脏缺血60min合并左半肝脏切除模型;HRS干预组建立手术模型并于门静脉置管在再灌注前10min及术后1、2、3d经静脉注射10mL/kg HRS。各组分别于术前、再灌注即刻、术后即刻、术后1d、术后3d经腹腔镜手术采取肝脏组织,进行HE染色检测,并检测肝脏组织中ERS参数:PKR样ER调节激酶(PERK)、需肌醇酶1(IRE1)、活化转录因子6(ATF6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP转录因子(CHOP)mRNA的表达水平。结果显示,模型组、HRS干预组肝脏组织病理变化较假手术组严重,且与假手术组相比,模型组、HRS干预组ERS相关参数mRNA表达水平上调;HRS干预组肝脏组织病理变化较模型组轻微,且各项ERS相关参数mRNA表达水平均低于模型组。结果表明,缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)能诱导肝脏ERS,导致肝脏损伤,而HRS可能是通过抑制过度的ERS从而减轻肝脏IRI。     

富氢生理盐水干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激影响的研究

为探究富氢生理盐水（hydrogen-rich saline，HRS）干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）影响，试验选取4~6月龄、体重20~30 kg的健康巴马小型猪18头，随机分为3组，每组6只，分别为假手术组、模型组和HRS干预组。假手术组仅进行翻动肝叶，维持气腹3 h；模型组用腹腔镜手术建立右半肝脏缺血60 min合并左半肝脏切除模型；HRS干预组建立手术模型并于门静脉置管在再灌注前10 min及术后1、2、3 d经静脉注射10 mL/kg HRS。各组分别于术前、再灌注即刻、术后即刻、术后1 d、术后3 d经腹腔镜手术采取肝脏组织，进行HE染色检测，并检测肝脏组织中ERS参数：PKR样ER调节激酶（PERK）、需肌醇酶1（IRE1）、活化转录因子6（ATF6）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、活化转录因子4（ATF4）、C/EBP转录因子（CHOP）mRNA的表达水平。结果显示，模型组、HRS干预组肝脏组织病理变化较假手术组严重，且与假手术组相比，模型组、HRS干预组ERS相关参数mRNA表达水平上调；HRS干预组肝脏组织病理变化较模型组轻微，且各项ERS相关参数mRNA表达水平均低于模型组。结果表明，缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，IRI）能诱导肝脏ERS，导致肝脏损伤，而HRS可能是通过抑制过度的ERS从而减轻肝脏IRI。     

脂肪干细胞条件培养缓解牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导的胰腺氧化应激损伤的研究

【目的】探究脂肪干细胞条件培养基(adipose-derived-stem cells conditioned medium,ADSCs-CM)缓解牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导的胰腺氧化应激损伤的保护作用机制。【方法】试验选择1只中华田园犬用来分离培养脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)以制备条件培养基(conditioned medium,CM),另选9只中华田园犬随机分为对照组(CON组)、急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型组(AP组)和CM治疗组(CM组),AP组和CM组经胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠(5% 0.1 mL/kg)、胰蛋白酶(3 500 U/kg)混合溶液,建立犬AP模型,CON组注射等量生理盐水。术后CM组静脉注射ADSCs-CM(0.1 mL /kg),CON组和AP组注射等量生理盐水,24 h后通过B型超声波检查胰腺回声情况和形态,采集胰腺组织样本进行病理组织学检测,采集血液样本进行犬胰腺特异性脂肪酶(cPL)、血气、血常规、生化指标检测,比色法检测血浆及胰腺总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i-NOS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)水平。【结果】B型超声波显示AP组及CM组胰腺回声不均匀,周围脂肪呈高回声。病理组织切片显示AP组胰腺肿胀出血、周围脂肪变性、十二指肠肠壁出血严重,胰腺出现间质水肿,大量炎性细胞浸润,多量细胞坏死崩解,严重出血。CM组胰腺及周围组织变化、细胞肿胀、炎性细胞浸润和出血较AP组轻微;cPL检测均为阳性。与CON组相比,AP组Cl^-、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLB)、总蛋白(total protein,TP)含量均显著降低(P＜0.05),淀粉酶(amylase,AMY)、脂肪酶(lipase,LIPA)、血浆T-NOS、胰腺i-NOS活性以及总胆固醇(total cholesterol,TCHO)、胰腺GSH含量均显著升高(P＜0.05);CM组Na⁺、Cl^-、GLB、TP含量均显著降低(P＜0.05),AMY、胰腺GPx活性以及胰腺、血浆GSH含量均显著升高(P＜0.05)。与AP组相比,CM组总CO₂(total CO₂,TCO₂)、Na⁺、Cl^-、ALB、TCHO含量以及血浆T-NOS活性均显著降低(P＜0.05),胰腺GPx活性、血浆GSH含量均显著升高(P＜0.05)。【结论】ADSCs-CM能减轻AP模型犬胰腺损伤程度,其发挥保护作用的机制与血浆中T-NOS活性降低及胰腺GPx和血浆GSH水平增高有着密切关系,本研究可为犬AP的治疗及ADSCs-CM的应用提供理论依据。     

虚拟现实技术在兽医腹腔镜技能训练中的应用

腹腔镜是最常用的微创外科技术之一,具有局部解剖精细、减少痛苦、术后恢复快及降低伤口感染风险等优点.缺乏标准的培训规程、缺少专用于兽医外科手术的训练设备等因素,是限制腹腔镜手术在兽医临床开展的重要原因.虚拟现实(Virtual Reality,VR)是通过数字化软件系统创建和模拟真实世界的技术,用户可以借助视觉、听觉及触觉等多种传感通道与模拟产生的虚拟世界进行交互.兽医外科医师的教学、培训和考核可以使用VR腹腔镜训练系统,帮助医师快速积累经验,实现完整的腹腔镜手术模拟训练过程,在兽医外科手术教学领域具有明显的优势.     

小型猪腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除对肝细胞凋亡及相关基因影响的研究

为探究小型猪腹腔镜肝脏缺血再灌注合并肝切除损伤对肝细胞凋亡及凋亡相关基因的影响,将12头巴马小型猪随机分为假手术组和模型组,假手术组仅建立气腹60 min,模型组右半肝缺血60 min后进行左半肝切除。应用TUNEL染色法检测肝细胞凋亡,qRT-PCR法检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 m RNA表达的变化,Caspase-3、Caspase-9活性检测试剂盒检测肝组织中Caspase-3和Caspase-9酶活性。结果显示,模型组Caspase-3和Caspase-9活性、Bax m RNA及细胞凋亡数量于术后即刻、1 d、3 d较假手术组显著升高;模型组Bcl-2 m RNA于术后即刻、1 d、3 d较假手术组显著降低。结果表明,腹腔镜肝脏缺血再灌注合并肝部分切除损伤可导致肝细胞凋亡,其机制可能与上调Bax m RNA和下调Bcl-2 m RNA的表达、Caspase-3和Caspase-9活性增强有关。     

手术模拟器和手术训练在兽医腹腔镜培训中的应用

腹腔镜手术是兽医临床有效的诊断和治疗多种疾病的技术，能够减少腹壁肌肉和神经的损伤，减轻术中对脏器的牵拉，降低术后疼痛以及伤口感染的概率。目前在兽医微创手术中练习腹腔镜技能的大多数模型都是一般任务训练器，由用于训练人类手术模拟器组成，这些模拟器具有物种解剖差异和手术程序差异等局限性。本文从兽医腹腔镜手术训练的任务、时间分配及模拟器类型等方面阐述了手术模拟器和手术训练在兽医腹腔镜培训中的应用，并指出需要开发更多针对兽医腹腔镜手术训练的模拟器和手术训练课程，以促进腹腔镜技术在兽医临床中的应用。