血清10型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染是主要危害2~8周龄雏鸭的高致病性细菌性传染病。为研制血清10型RA灭活油乳剂疫苗,选取10株血清10型RA分离株进行动物体复壮、分离和鉴定后,分别对部分毒株进行了毒力测定和灭活油乳剂疫苗的研制。结果表明,所有试验用分离株对7日龄雏鸭均具有较强的致病力。分离株YXL1和HXb2的半数致死量分别为2.8×108 cfu和82 cfu,不同菌株之间的毒力差异很大。用研制的灭活油乳剂疫苗对雏鸭进行2次免疫后,免疫鸭可获得高水平的特异性抗体,并可抵抗强毒RA的攻击,以HXb2免疫后的攻毒保护性最好。抗体水平检测和攻毒保护试验结果表明,用血清10型RA分离株HXb2制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护作用。     

鸭疫里默氏杆菌TonB依赖性受体TbdR2基因缺失株的构建

用PCR方法扩增tbdR2基因的左右臂和壮观霉素抗性基因表达盒,然后将以上3个片段组成的同源重组同源臂LSR连接到自杀性质粒pDS132上,构建得到重组自杀质粒pDS-TbdR2-LSR.再将此质粒通过接合转导的方法导入到鸭疫里默氏杆菌CH3株.用含卡那霉素和壮观霉素的TSA筛选可能的基因缺失株,并对其进行PCR鉴定,获得基因缺失株CH3△tbdR2.CH3△tbdR2稳定性检测结果表明该缺失株能够稳定存在.另外,CH3△tbdR2突变株在电镜下的细菌形态以及在TSA培养基上的菌落形态与野生株CH3相似.表明通过自杀质粒同源重组的方法获得了鸭疫里默氏杆菌CH3株TonB依赖受体TbdR2的基因缺失株CH3△tbdR2,为下一步研究TbdR2的功能奠定了基础.     

青蒿素对CCl4致犬急性肝损伤模型抗氧化指标的时效影响

以50％CCl4花生油溶液1mL／kg体重多点皮下注射制造犬急性肝损伤模型,试验组犬自造模后每天以青蒿素溶液（1g生药／mL药液）1mL／kg体重灌胃,对照组不做任何处理。前肢正中静脉采血分离血清,检测血清中MDA、T-AOC含量和AKP、GSH—PX活性。观察青蒿素对模型犬机体抗氧化水平的影响及保护、修复受损肝细胞的作用。     

养殖环境对樱桃谷鸭的生产性能和免疫功能影响

目的探讨养殖环境对樱桃谷鸭生产性能和免疫功能的影响。方法选取体质健康、体重中等的1日龄樱桃谷鸭400羽,随机分为实验组和对照组,200羽/组。实验组禽舍不清洁、不消毒、自然通风;对照组禽舍定期清洁、常规消毒,采用排气扇通风换气。定期检测两组鸭舍内空气载菌量、氨气浓度、生产性能指标、免疫器官指数及血清中皮质酮含量。结果实验组与对照组比较,21日龄~49日龄,气载需氧菌及真菌浓度均高于对照组,差异极显著(P<0.01);实验组氨气浓度高于对照组,差异极显著(P<0.01);实验组生产性能降低(P<0.05)、死亡率增高(P<0.01);胸腺指数低于对照组(P<0.01);28日龄~49日龄,实验组血清皮质酮含量高于对照组,差异极显著(P<0.01)。结论养殖环境对樱桃谷鸭的生产性能和免疫功能具有显著影响,提供良好的饲养设施条件,是健康养殖的重要保障。     

从鸭腹水综合征病鸭体内分离鉴定到血清1型鸭肝炎病毒

2011年4月份,河北省某地一些鸭场饲养的20～45日龄的樱桃谷肉鸭发生了以腹腔中充满大量清亮、茶色或啤酒样腹水为主要病变特征的疾病,即鸭腹水综合征。采集两个不同日龄的病死鸭肝脏样品,接种SPF鸭胚进行病毒分离,获得两个病毒分离物（HB01和HB02）。这两个病毒分离物对鸡、鸭和鹅的红细胞均无血凝活性。RT-PCR或PCR检测表明,HB01和HB02中鸭肝炎病毒检测为阳性,而鸭呼肠孤病毒、鸭圆环病毒、鸭黄病毒等检测均为阴性。将HB02接种5日龄SPF鸭,致死率为40%;对20日龄的鸭不致死。HB02分离物中鸭肝炎病毒的序列分析表明其与鸭肝炎病毒NA株及弱毒疫苗株C80和F64遗传距离较近。根据试验结果,推测鸭肝炎病毒可能是诱发本次鸭腹水综合症的因素之一。     

鸭疫里默氏杆菌血凝素基因的克隆、表达及其蛋白的定位分析

为研究鸭疫里默氏杆菌(R.anatipestifer)血凝素蛋白的功能,本实验克隆表达了鸭疫里默氏杆菌血凝素基因,并对其蛋白定位进行了分析。根据鸭疫里默氏杆菌CH3株血凝素基因序列设计一对特异性引物,采用PCR扩增不同血清型鸭疫里默氏杆菌的血凝素基因,进行序列测定与分析。结果表明其血凝素基因全长1 059 bp,编码352个氨基酸。不同血清型鸭疫里默氏杆菌血凝素间的氨基酸同源性为94.1%～100%,与黄杆菌3519-10株血凝素的氨基酸同源性为68.0%～68.9%。采用表达的血凝素蛋白免疫鼠血清和鸭抗鸭疫里默氏杆菌阳性血清对血凝素在细菌中的定位分析表明,鸭疫里默氏杆菌血凝素可能不是一种膜蛋白,而是存在于胞浆中的一种蛋白。