日本脑炎病毒的流行病学及疫苗研究进展

正日本脑炎(Japanese Encephalitis,JE)又称为流行性乙型脑炎,简称乙脑,是一种人畜共患的法定报告传染病。JE主要在亚太地区流行,我国除新疆、西藏和青海省(自治区)没有JE病例报道外,其它各省(自治区)均是JE流行区,其中河南、四川、重庆、贵州、云南5省(市)被划定为JE高度流行区[1]。据WHO统计,全球每年大约有6.8万JE临床病例,大约50%发生在我国大陆[2]。JE的     

表达PRRSV N蛋白稳定细胞系的构建与鉴定

旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) N蛋白的Marc-145细胞系。以PRRSV SH1株感染性克隆质粒为模板，通过PCR扩增N基因，并将其克隆到慢病毒载体中，获得重组慢病毒质粒pSin-Ires-Puro-N,将重组质粒pSin-Ires-Puro-N与辅助质粒psPAS2、pMD2.G、pRSV-Rev共转染293T细胞进行慢病毒包装，获得表达N蛋白的重组慢病毒颗粒并将其感染Marc-145细胞，嘌呤霉素初步筛选阳性细胞，筛选几代后的细胞采用有限稀释法和终点稀释法获得稳定表达N蛋白的Marc-145细胞系。通过PCR鉴定表明细胞系中存在N蛋白基因，通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验验证N蛋白能在细胞系中能稳定表达。本研究成功构建了稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系，为研制PRRSV新型复制缺陷型疫苗奠定基础。