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DUFs家族是一类未知功能结构域蛋白家族,转录谱和蛋白谱分析发现,DUFs蛋白在生物的生长和发育中发挥着至关重要的作用,因此对DUFs基因功能的研究将有助于了解生物体复杂的生长发育机制。目前该家族基因功能仍鲜见报道。为了探究水稻(Oryza sativa)OsDUF393(Domains of Unknown Function 393)基因的生物学功能,利用CRISPR/Cas9技术构建了水稻DUFs家族基因OsDUF393的载体,同时利用农杆菌介导的遗传转化将构建的CRISPR/Cas9载体转化水稻品种中花11中,经潮霉素抗性基因鉴定,获得了100株T0代转基因植株。对转基因植株的靶位点进行测序分析后发现有单碱基插入和大片段DNA序列缺失2种类型。通过RT-PCR分析突变体中OsDUF393基因的表达水平,结果表明,目的基因在不同纯合编辑突变体中转录水平均有下降。上述结果表明,CRISPR/Cas9重组载体成功实现了对OsDUF393基因的定向编辑。这些编辑突变体材料为后续该基因功能研究奠定了基础。 相似文献
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我国奶酪市场潜力巨大,促进奶酪产业发展是当前和今后一个时期内推进奶业振兴的重点工作之一。再制奶酪是以天然奶酪为原料,经融化再制的奶酪产品,也是全球各地借助天然奶酪进行深加工来丰富奶酪品种的主要途径。整理了20世纪80年代在德国学习期间有关再制奶酪的品控经验,结合国内再制奶酪生产的实际情况,组织有关技术人员研究撰写,旨在帮助国内奶酪生产企业避免生产中的质量缺陷,提高再制奶酪品质。重点论述了如何预防再制奶酪生产中常见的质量问题,便于更好地把握、理解技术要点与生产工艺,以满足生产一线技术人员的实际需要,对有效解决和预防再制奶酪生产中常见质量问题具有现实意义。 相似文献
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以长春花下胚轴为基因转化的受体材料,利用根癌农杆菌EHA105介导,将g10h基因转化到3种不同品系的长春花中.结果表明,附加100 ümol·L-1乙酰丁香酮的根癌农杆菌悬液在OD600=0.5~0.6时侵染效果较好;PCR分子检测转基因植株部分呈现阳性,证明g10h基因已整合到长春花基因组中,3种不同品系的长春花的再生率和阳性率存在差异;采用Real time PCR技术进一步检测g10h基因表达情况,结果表明转基因长春花植株中g10h mRNA表达量比非转基因对照高1.62~3.79倍. 相似文献
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实验在草莓茎段的组织培养过程中,对外植体不同消毒时间,最佳诱导培养基、分化培养基与生根培养基进行了筛选。结果表明,0.1%升汞对茎段消毒2min时效果最好;诱导愈伤的最佳培养基为:MS+1.5mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA;最佳分化的培养基为:MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA;最佳生根培养基为:MS+0.25mg·L-16-BA。 相似文献
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在肉鸡产业中洛克沙胂被广泛使用。本文就洛克沙胂对环境的影响进行了综述。总之,砷以洛克沙胂的形式添加到家禽饲料中,并最终被排到家禽废弃物中。新鲜废弃物主要含洛克沙胂,而老化废弃物主要含无机砷。长期使用家禽废弃物作为肥料可使土壤中砷浓度超过马里兰州(MD)的砷土壤背景修复标准。由于砷会在土壤中不断积累,所以人们认为使用含砷的家禽废弃物作为肥料是不可持续的。在土壤表层施加含洛克沙胂的家禽废弃物不会影响深层地下水中砷的浓度,但它在沉淀后可以无机砷的形式转运到受纳水体和浅层地下水。因而在一些以农业为主的受纳水体和沉积物中砷的水平超出了限量标准。砷在鱼和贝类中主要以有机砷形式存在。磷营养管理趋于限制一些区域(该区域相对于作物的需求已过度使用磷)家禽废弃物的使用,从而降低了砷的使用率和累积。尽管大部分地表土壤中的砷处于紧密结合状态,但随着地表土壤结合砷的含量增加,其向地表下层渗透的能力增强,然而,由于地表下层土壤中的粘土矿物质、铁和铝的氧化物都具有非常强的砷结合能力,在大部分土壤中这种渗透作用有限。2012年马里兰州通过了一项法律,禁止在家禽饲料中使用除硝苯胂酸以外的砷类添加剂。2013年美国食品和药物管理局(USFDA)撤销了洛克沙胂、卡巴胂和对氨基苯胂酸的使用许可,并正在审查硝苯胂酸。 相似文献
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【目的】农作物对逆境胁迫的耐受能力与产量息息相关,是作物育种要考虑的重要因素。文中对水稻顺式还原酮加双氧酶基因OsARD1进行研究,分析其表达模式,明确其在水稻应对非生物胁迫中的功能,为水稻耐旱品种的分子设计及育种提供参考依据。【方法】提取不同组织器官的总RNA,利用RT-PCR方法分析OsARD1表达的组织特异性。利用不同的非生物胁迫处理14 d大小的野生型(中花11)植株,在不同时间点提取总RNA,利用RT-PCR方法分析OsARD1表达的受诱导情况。通过农杆菌遗传转化法转化水稻愈伤组织,经过一系列分子检测后获得稳定遗传的T1代OsARD1的过量表达转基因植株,以转入空载体的野生型植株作为对照。将在营养液中正常培养的12 d大小的野生型和过表达幼苗移出营养液进行缺水处理并进行恢复试验。将催芽后的野生型和过表达转基因植株种子种在含有5% PEG6000的agar培养基中进行渗透胁迫处理,以不含PEG6000的agar培养基作为对照,观察二者的表型。【结果】组织特异性表达分析表明OsARD1主要在根及成熟的组织中表达,尤其在衰老的组织中有较高表达。非生物胁迫处理表明OsARD1的表达明显受机械损伤、高盐和渗透胁迫的诱导。获得6个独立株系的可稳定遗传的OsARD1过量表达转基因植株。对过量表达转基因植株及空载体野生型对照进行干旱胁迫处理,缺水处理5 h后,野生型植株叶片卷曲皱缩成针状表现出严重的缺水症状,但此时过表达转基因植株叶片仍处于舒展状态;缺水处理8 h后开始复水培养3 d,野生型植株的存活率仅为10%,而过表达植株存活率为80%,远远高于野生型,说明过量表达OsARD1提高了水稻对缺水的耐受能力。用PEG渗透胁迫模拟干旱胁迫处理6 d后发现,不含PEG6000对照组中野生型和过表达植株的幼苗生长情况没有明显的差别;在PEG处理组中,野生型幼苗根的生长受到严重抑制,而过表达植株幼苗根的生长受到抑制较小,根长明显长于野生型对照植株,说明过量表达OsARD1增强了水稻耐受干旱胁迫的能力。【结论】OsARD1主要在水稻根及成熟的组织中表达,并且受机械损伤、高盐和渗透胁迫的诱导。过量表达OsARD1提高了水稻抗旱性能。 相似文献