无机磷溶解菌RW8的筛选、鉴定及对白三叶促生效果研究

从白三叶根际分离筛选9株溶磷微生物,并对挑选菌株进行形态、细胞以及种属鉴定,并分析其对白三叶的促生效果。通过分析溶磷圈与溶磷菌落直径的大小与比值获得溶磷量与持续溶磷能力较强的RW8菌株。通过形态与扫描电镜观察发现RW8是具有鞭毛的短杆菌,其菌落形态表面光滑,不透明;将RW8 16S rDNA序列比对NCBI数据库发现其与阴沟肠杆菌属(Enterobacter sp.)的同源性高达99.5%,Biolog鉴定其与阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae ss dissolvens)的相似性为0.610。RW8溶磷量达424.85 μg/mL,溶磷能力可能与RW8的产酸性能(12.30 μg/mL)密切相关。RW8对白三叶根系与幼苗的生物产量的分配有显著影响,接种RW8后能抑制白三叶根系伸长,根系鲜重与干重有下降趋势,但差异不显著;而幼苗的生物产量(干重与鲜重)均显著高于对照(P<0.05),并且该现象与植物生长激素IAA无关,其具体的作用机制还有待于进一步研究。     

体外产气法研究不同NFC/NDF底物条件下外源纤维素酶的适宜添加水平

本试验旨在利用体外产气法研究不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维(non-fiber carbohydrates/neutral detergent fiber, NFC/NDF)的底物条件下外源纤维素酶(exogenous fibrolytic enzymes, EFE)对底物产气、降解和发酵特性的影响,找出不同底物条件下适宜的EFE添加水平。采用2×5交叉分组试验设计,5个NFC/NDF底物水平 (0.85、1.02、1.19、1.36和1.53)分别添加5种水平的EFE(0, 2, 4, 8 和16 mg/g DM)进行体外发酵。结果表明,1)不同NFC/NDF底物和EFE水平对体外总产气量(GP₄₈)和产气参数(b、c和L)均有显著的影响(P<0.05),且两因素互作显著(P<0.05);底物1中, GP₄₈、b和c值随EFE剂量的增加显著地线性和二次提高(P<0.05),其中以16 mg/g 水平组较高,L值则呈相反趋势;底物2~4中,GP₄₈、b和c值随EFE剂量增加显著地二次提高(P<0.05),其中以4 mg/g 水平组较高。2)不同底物对干物质消失率(DMD)、酸性洗涤纤维降解率(ADFD)、中性洗涤纤维降解率(NDFD)和氮降解率(ND)均有显著的影响(P<0.05),除ND外,EFE水平的添加效应呈现相似结果;底物1条件下,随着EFE添加剂量的提高,DMD、ADFD和NDFD显著地线性提高(P<0.05),其中均以16 mg/g组最高(P<0.05);而底物2~4中则以4 mg/g组最高(P<0.05)。3)不同NFC/NDF底物和EFE水平对瘤胃发酵参数均有显著影响(P<0.05),除丙酸外,两种因素对其他指标的互作效应均显著(P<0.05);在底物1~4条件下,随着EFE添加剂量的提高,除丙酸以外的其他发酵参数显著地线性和二次提高或降低(P<0.05);底物1中,对照组pH值、氨态氮含量和丁酸摩尔浓度显著高于4、8和16 mg/g组(P<0.05),相反,16 mg/g组的总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸摩尔浓度和乙酸∶丙酸值较高;底物2~4条件下,pH值和氨态氮含量以4 mg/g组较低,而TVFA、乙酸摩尔浓度和乙酸∶丙酸值则呈相反的趋势。4)NFC/NDF=1.53时,添加EFE对体外产气参数、降解特性和发酵特性均无显著影响(P>0.05)。由此,本试验发现,NFC/NDF底物影响了EFE的添加效应,NFC/NDF=0.85时,16 mg/g EFE水平组有较好纤维降解效果;NFC/NDF分别为1.02、1.19和1.36时,EFE最适添加剂量为4 mg/g;NFC/NDF=1.53时,底物中添加EFE没有正面效应。     

影响畜禽肉质的主要因素及其作用机制

随着生活水平的提高,人们对肉类的要求已经逐渐从数量向质量转变,因此肉类品质越来越受到关注.影 响肉质的因素很多,主要归纳为遗传和环境两方面,其中基因和饲养管理分别是影响肉质的重要因素.因此,本 文就肉质的评定指标、肉质的影响因素以及这些因素对肉质的调控作用机制进行探讨,为今后肉质的研究提供 参考依据.     

牧草促生菌分离鉴定及对大豆促生性能的研究

以大豆(黔豆 1号)为研究对象，从贵州不同地区采集的根瘤样品中，挑选菌落隆起、边缘整齐、有粘液，且固氮酶活性较高的 6个菌株进行鉴定并制成复合接种剂，分析不同组合处理对大豆的株高、根长、根瘤数、地上与地下部分生物产量等的影响，测定了营养品质粗蛋白(CP)、中性纤维(NDF)、酸性纤维(ADF)、全磷(P)、钙(Ca)的含量，旨在从中筛选出与大豆植株共生匹配最佳的组合菌株。结果表明:经鉴定其中 4株是根瘤菌(R286-1、R287-3、R310-1、R325-3)，2株为内生细菌(R286-5、R287-5)。与单一接种根瘤菌处理相比，大多组合接种剂可显著促进大豆的茎粗，地上部分干物质重量 B2，D1和 D2的效果最明显，A1、B1和 D1增加根系生物量的效果最佳，根瘤数 A2、B2、C1和 D1结瘤最多。加施内生细菌能显著提高植物的 CP含量，复合菌剂比 CK提高 4.6%～13.1%，Ca含量仅 D1比 CK下降11.3%，其他组合提高 4.1%～20.8%，明显降低了ADF含量(除A1、B1、B2、D1)。综合分析，应用生产潜力最大的 4个菌组为A2、B2、C1、D2，为大豆菌肥的研制奠定试验基础。     

促生菌菌株的分子鉴定及对黑麦草的促生效应研究

为明确菌株的种属及其促生效应,筛选优良的根际促生菌,本研究以黑麦草为材料,通过盆栽实验分析菌株的促生效应。结果表明,5个菌株都具有固氮能力,固氮酶活性在110.94～167.64IU/L范围内。经鉴定,CS 1-5为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai),CS 5-1为Paraburkholderia phytofirmans,CS 8-4为树木伯克氏菌(Burkholderia arboris),CS 8-7为洋葱伯克氏菌(Burkholderia cepacia),CS 10-5为萨拉曼卡假单胞菌(Pseudomonas helmanticensis)。5个菌株对黑麦草的地上生物量、N、P含量及根的生长等均有明显的促进作用,其中菌株CS 8-4和CS 8-7的促生作用显著且较全面,具有开发成微生物菌肥资源的潜力。     

不同氮磷条件下施加促生菌对多花黑麦草生长的影响

为进一步筛选适于田间条件的根际促生菌(PGPR),从豆科和禾本科植物根际分离出活性较强的3株固氮菌(C1、C2、C3)和3株溶磷菌(P1、P2、P3),经16S rRNA基因序列分析后,接种于多花黑麦草品种邦德,并探讨在单一固氮菌替代50%氮肥、单一溶磷菌替代全磷以及固氮菌和溶磷菌的不同组合替代50%氮肥+无磷三种条件下多花黑麦草生物量、氮磷含量的变化。结果表明:分离的溶磷菌为肠杆菌属和假单胞菌,固氮菌为伯克霍尔德氏菌和芽孢杆菌,都是较好的益生菌种,固氮酶活性在131.20~135.48IU/L之间,溶磷量在239.84~287.44μg/mL之间。施入单一菌剂的多花黑麦草生物产量、氮磷含量以C2和P2表现最佳;施组合菌肥的多花黑麦草生物量、全N及全P含量比无菌肥组对照显著提高(P<0.05),比施单一菌肥效果好,综合分析表明P3+C1和P1+C1促生效应最佳,应用潜力最大。     

不同石漠化程度对灌丛草地土壤细菌遗传多样性的影响

为探讨石漠化对灌丛草地土壤细菌遗传多样性的影响,在贵州省普定县石漠化治理区采集潜在(A)、轻度(B)、中度(C)和重度石漠化(D)4种不同类型的灌丛草地土样,并以石缝玉米耕作地为对照(E),应用PCR-DGGE技术对土壤细菌群落结构进行了研究。结果表明:样地A的香农指数与丰富度指数均高于样地B,C,D,说明随着石漠化的加剧,细菌群落的复杂度与丰富度呈下降趋势,而对照组(E)最低,这表明耕作后土壤中细菌的复杂度与丰富度显著下降。通过聚类分析发现对照组E为一个族,A,B,C,D为一个大族,其中样地A与B,样地C与D土壤细菌PCR-DGGE图谱相似度较高。在系统发育树分析中发现13个序列片段聚成了10个分支,土壤细菌在不同程度石漠化灌丛草地土壤中会形成不同的群落结构,并具高度的遗传多样性。     

高羊茅FaRVE8基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

生物钟是一个复杂的调控网络,在环境的不断变化中促进植物的生长,REVEILLE8 (RVE8)是生物钟的重要基因。为探讨其分子机理,采用RT-PCR和RACE方法,克隆高羊茅叶片FaRVE8基因,结果显示,FaRVE8全长为1881 bp,有1236 bp的开放阅读框,编码411个氨基酸,同属于MYB样因子。遗传进化树表明其与禾本科植物二穗短柄草、节节麦、大麦的同源蛋白亲缘关系较近。利用荧光定量分析高羊茅叶片中FaRVE8在不同光照处理下的表达特征,结果表明,FaRVE8在不同光照处理下均有表达,且呈现出明显的昼夜节律。亚细胞定位显示FaRVE8定位在细胞核中,可能在细胞核中发挥重要作用。以上研究表明,FaRVE8在调节生物节律中有重要作用,为进一步探讨FaRVE8基因的功能和分子调控机制奠定基础。     

不同促生菌培养发酵分泌的激素和有机酸含量

为复合促生菌肥研制提供参考,以前期筛选试验较优的2株溶磷菌(P_1和P_2)和2株固氮菌(C_1和C_2)为试材,对溶磷菌剂、固氮菌剂和溶磷菌+固氮菌组合的菌剂进行培养,采用高效液相色谱法测定发酵液分泌的激素和有机酸含量。结果表明:不同菌剂均未分泌脱落酸(ABA),均分泌生长素(IAA)和赤霉素(GA3),P_2+C_1组合菌剂分泌的IAA和GA3极显著高于P_2,分别较P_2增加51 329. 51%和100. 42%; P_1+C_2组合菌剂分泌的IAA和GA3较P_1低24. 81%和51. 45%,且GA3含量差异显著;激素组合分泌的总量以P_2+C_1最多,为155. 781μg/m L,P_1+C_2最少,为3. 967μg/m L。所有组合的菌剂都分泌草酸、乳酸、苹果酸和柠檬酸,P_2+C_1组合菌剂分泌的甲酸、苹果酸、柠檬酸和丁酸含量都极显著高于P_2,较P_2分别增加40. 93%、1051. 89%、357 747. 29%和749. 48%; P_1+C_2分泌的草酸、甲酸、苹果酸和柠檬酸均显著高于P_1,较P_1分别增加627. 66%、89. 30%、252. 89%和37 971. 47%;总有机酸含量都大于单一菌剂的分泌量,且差异显著。P_2+C_1发酵液分泌的激素和有机酸最多,分别为155. 781μg/mL和18 318. 38μg/mL,是最佳组合菌剂。