传染性法氏囊病病毒新型变异株的分离和鉴定

为调查我国部分地区规模化养鸡场传染性法氏囊病病毒(IBDV)新型变异株流行现状，参考IBDV VP2蛋白高变区序列设计Taqman-MGB探针和引物，建立IBDV快速检测方法，利用其检测来自河北邯郸、江西宜春、重庆7家大型育雏场送检法氏囊病料，并对阳性病料进行病毒分离、测序和进化分析。成功建立了一种兼顾IBDV鉴定和测序分型的荧光定量PCR方法，该方法在10¹～10⁸拷贝/μL范围内具有良好线性关系(相关系数为0.9963),扩增效率良好(扩增效率为109%),对其他常见病毒无扩增，最低检测限为1.25×10¹拷贝/μL;利用该方法检测邯郸地区4家育雏场送检样品均为阳性，测序均为IBDV新型变异株，采用鸡胚自阳性样品中分离到3株IBDV(T2021与T2022、J2021);对分离株A节段测序发现，3株IBDV分离株均属国内新型变异株，与国内新型变异株SHG19氨基酸同源性为100%,核苷酸同源性为98.0%～98.6%,T2021与T2022、J2021分属两个进化分支。建立了一种IBDV快速检测方法，发现IBDV国内...