普鲁兰酶氮端氨基酸的截短对其酶学性质的影响

淀粉是丰富的生物质资源,已被广泛地应用到食品、酿酒、医药等各个相关的领域.普鲁兰酶(pullulanase,pulA,EC 3.2.1.41)作为淀粉脱支酶,可以水解淀粉中的α-1,6糖苷键,最大限度地降解淀粉原料,提高淀粉利用率.因此,寻找一条国产化的道路开发我国自己的普鲁兰酶,具有长远的意义.课题组前期从淀粉厂附近的土壤中筛到一株普鲁兰酶的高产菌株变栖克雷伯氏菌(Klebiella variicola)strain 7,克隆获得pulA基因(GenBank登录号:KJ146839.1)后在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3)中异源表达.为提高该蛋白的表达量和分泌效率,同时改善普鲁兰酶的性质,本研究利用基因工程的手段构建了普鲁兰酶去信号肽突变体M1和氮端31个氨基酸的截短突变体M2,结果显示M1和M2最适温度均为45 ℃,二者的最适pH分别是6.0和5.6;M2的半衰期是37 min,是M1的6.17倍;M2的比酶活是582.204U/mg,是M1的1.6倍.动力学分析显示,以普鲁兰糖为底物时,M2的Vmax、Kcat、Km和Kcat/Km分别为0.001 3μmoL/(mL·s)-1、191.80-1 s.-1、0.30 mg/mL、693.30,与M1相比,M2的底物亲和能力增加,同时催化效率是M1的2倍.本研究通过普鲁兰酶氮端氨基酸的截短,为提高酶的比酶活和半衰期提供了新的方法和思路.     

丁酸梭菌对蛋鸡产蛋后期生产性能、蛋品质及肠道组织形态的影响

为了研究饲粮中添加丁酸梭菌对蛋鸡产蛋后期生产性能、蛋品质及肠道组织形态的影响,选取270只70周龄产蛋率接近的海兰褐蛋鸡,随机分为3组,每组6个重复,每个重复15只鸡,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ组在基础饲粮中分别添加2.5×10~8 CFU/kg、5×10~8 CFU/kg丁酸梭菌。预试期7 d,正试期45 d。结果表明:(1)饲粮中添加丁酸梭菌能够显著提高蛋鸡产蛋后期的产蛋率(P0.05),但对蛋鸡的平均日产蛋重、平均日采食量、料蛋比及破软蛋率无显著影响(P0.05);(2)饲粮中添加丁酸梭菌对蛋鸡产蛋后期的平均蛋重、蛋白高度、哈氏单位、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄相对重、蛋壳相对重及蛋黄胆固醇含量无显著影响(P0.05);(3)饲粮中添加丁酸梭菌能显著提高蛋鸡空肠、回肠的绒毛高度、回肠的绒隐比及十二指肠、回肠的肠壁厚度(P0.05),且饲粮中添加2.5×10~8 CFU/kg丁酸梭菌能够显著提高蛋鸡十二指肠的绒毛高度(P0.05)。由此可见,在该试验条件下,饲粮中添加丁酸梭菌能够改善蛋鸡产蛋后期的生产性能和肠道组织形态。     

粪肠球菌对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质及肠道组织形态的影响

试验旨在研究添加不同剂量的粪肠球菌对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质及肠道形态结构的影响。选取70周龄产蛋率相近的海兰褐蛋鸡270只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复15只鸡。试验设对照组（饲喂基础日粮）、试验Ⅰ组（基础日粮+3.75 mg/kg粪肠球菌）和试验Ⅱ组（基础日粮+7.5 mg/kg粪肠球菌）,预试期7 d,正试期50 d。结果表明,与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组产蛋后期蛋鸡产蛋率、产蛋量极显著提高（P<0.01）,料蛋比极显著降低（P<0.01）;与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组蛋鸡的蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄相对重、蛋壳相对重均无显著变化（P>0.05）;与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组产蛋后期蛋鸡十二指肠、回肠的黏膜厚度极显著增加（P<0.01）,回肠绒毛高度显著提高（P<0.05）。综上所述,在产蛋后期蛋鸡日粮中添加适宜剂量的粪肠球菌可提高蛋鸡生产性能,改善肠道形态结构。     

非蛋白氮在反刍家畜饲料豆粕减量替代中的潜力

反刍动物由于其独特的瘤胃功能,可以利用部分非蛋白氮（NPN）,这是行业共识,但目前NPN推广使用中存在一些问题,致使实际使用量与潜在需求量相去甚远。我国反刍家畜饲用尿素年需求量在120万t以上,可替代535万t豆粕,相当于5487.2万亩耕地面积的大豆产出。因此,采取综合措施将NPN作为一种常规饲料原料应用于反刍家畜生产中,可成为饲料豆粕减量替代方案提效开源的有益补充。     

色氨酸调控生猪肠道屏障功能的研究进展

色氨酸是生猪日粮的第三限制性氨基酸，在调控采食、免疫、生长及肠道发育等方面发挥重要作用。在日粮中添加适量色氨酸，可以提高猪只的采食量、调控肠道屏障功能，也可以影响肠道氨基酸转运载体的表达。本文针对日粮色氨酸对生猪肠道屏障功能的影响进行了归纳总结。