绒山羊瘤胃甲烷菌mcrA基因的RFLP分析(英文)

[Objective] The aim of this study is to understand the population composition of methanogens in rumen fluid of grazing Inner Mongolian cashmere goat. [Method] Total DNAs of various bacteria in rumen fluid were isolated for PCR amplification using the specifically designed primers based on conservative mcrA sequence of methanogens; then mcrA specific clone library was accordingly established. The restriction fragment length polymorphism(RFLP) of the library was further analyzed by digestion of restriction enzyme Taq I. [Result] One hundred and five randomly selected specific colonies were classified into six RFLP types, among which the dominant type accounts for 38%, and other types account for 27%, 18%, 5.5% and 4.5%, respectively. [Conclusion] There are at least six different methanogens in rumen fluid of grazing Inner Mongolian cashmere goat.     

瘤胃总甲烷菌实时荧光定量PCR方法的构建

试验构建了瘤胃总甲烷菌实时荧光绝对定量PCR的标准品及标准曲线用于总甲烷菌的定量测定,并提取瘤胃微生物总DNA,以甲烷菌特异性引物进行PCR扩增,回收纯化PCR产物,与pBS-T载体连接并转化到大肠杆菌,再用氨苄西林培养基筛选阳性重组质粒,提取含目的片段质粒DNA,通过PCR及测序鉴定重组质粒.根据OD值确定浓度,将梯度稀释的质粒作为模板,进行荧光定量PCR反应并作出标准曲线.结果表明:所构建的标准曲线具有很高的相关性(R2=0.992),并获得了高扩增效率产物.     

养蚕和蘑菇的复合经营(摘译)

<正> 为了提高蚕期外养蚕设施的最大利用率,本文探讨了山区立地条件下,能够在较低温度时栽培的作物,并从蘑菇栽培着手,看养蚕和复合栽培蘑菇的可行性。养蚕和蘑菇栽培的作业体系蚕期一般是从5月中旬到9月下旬左右,这期间完成5个蚕期。整个冬季里,     

瘤胃总甲烷菌实时荧光定量PCR方法的构建

试验构建了瘤胃总甲烷菌实时荧光绝对定量PCR的标准品及标准曲线用于总甲烷菌的定量测定,并提取瘤胃微生物总DNA, 以甲烷菌特异性引物进行PCR扩增, 回收纯化PCR产物,与pBS-T载体连接并转化到大肠杆菌,再用氨苄西林培养基筛选阳性重组质粒, 提取含目的片段质粒DNA, 通过PCR及测序鉴定重组质粒.根据OD值确定浓度, 将梯度稀释的质粒作为模板, 进行荧光定量PCR反应并作出标准曲线.结果表明: 所构建的标准曲线具有很高的相关性(R2=0.992), 并获得了高扩增效率产物.     

甲烷气体产生量与牧草营养参数的相关性分析

为分析野生牧草的营养参数与甲烷气体产生量之间的相关性,采集内蒙古山羊喜食的4科31种处于生长旺盛期野生牧草测定营养参数,以上述牧草为底物,进行体外发酵并测定甲烷气体产生量.体外培养条件下牧草的甲烷气体产生量与牧草中的粗蛋白(CP)、干物质消失率(IVDMR)含量呈正相关,与中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量呈负相关,与无氮浸出物(NFE)含量相关性表现不一致;体外培养条件下4科牧草的甲烷气体产生量的预测模型为Y=5.962+O.107CP+O.035NDF-0.135ADF+0.(NONFE+0.001IVDMR(R=O.767,P<0.001).     

幼雏期必需脂肪酸营养的研究

本文研究了用不含必需脂肪酸——亚油酸(C18:2)和花生四烯酸(C20:4)以及非必需脂肪酸——亚麻酸(C18:3)的纯制日粮饲喂幼雏,对其增重、饲料摄取量、饲料报酬和胸肌、腿肌、肝脏、皮肤中脂肪酸组成的影响。供试鸡为54只白来航公雏、供试饲料列于表1。     

体内法与体外法测定反刍动物日粮的甲烷产生量比较

[目的]探索反刍动物的甲烷排放量的预测方法。[方法]利用体内法(SF6示踪技术)和体外发酵产气法(IVGPT),研究不同方法测定内蒙古白绒山羊日粮的甲烷产生量和消化率的差异。[结果]IVGPT测定5种日粮的甲烷产生量有低于比SF6示踪技术测定结果的趋势,除沙打旺日粮外差异均不显著(P>0.05)。IVGPT测定的日粮消化率均比SF6示踪技术的测定值高,除青贮玉米外差异均显著(P<0.05)。IVGPT法测定5种日粮的甲烷产量平均值为26.21 L/kg,SF6示踪技术测定的甲烷产量平均值为27.73 L/kg。IVGPT法与SF6示踪技术测定的甲烷产生量具有较高的相关性,相关系数为0.913。[结论]IVGPT测定的甲烷产生量与SF6示踪技术测定值非常接近,说明可用IVGPT法估测反刍动物采食不同种日粮的甲烷产生量。     

不同饲养条件下内蒙古绒山羊瘤胃甲烷菌组成的研究

为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的种群组成.选取甲烷菌mcrA基因的特异性引物序列,利用PCR技术对从瘤胃液中抽提的细菌总DNA进行扩增,并建立了甲烷菌特异性的mcrA基因文库.用限制性内切酶Taq I对该文库特异性片段进行了限制性酶切片断长度多态性分析(Restriction fragment lengthpolymorphism,RFLP).放牧和舍饲内蒙古绒山羊瘤胃中甲烷菌的mcrA基因片段被分成6个不同的RFLP类型,并由此建立了DNA指纹图谱;系统发育树分析表明,其属于甲烷杆菌目和甲烷微菌目,且绒山羊瘤胃中的甲烷菌大部分属于甲烷短杆菌.放牧绒山羊瘤胃内甲烷菌种类比舍饲绒山羊更加丰富,6种甲烷菌所占比例均较高,而舍饲绒山羊只有两种优势菌比例较高,其他几种所占比例极低.