猪瘟病毒E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点整合载体的构建

 【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体，为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫苗奠定基础。【方法】通过用BLAST、DNAMAN等分子生物学分析软件对百脉根叶绿体基因组序列进行分析选定同源重组片段，采用PCR、分子克隆技术进行载体构建和鉴定。【结果】在百脉根叶绿体基因组中选择合适的外源基因整合位点，设计引物用PCR扩增叶绿体同源片段，将同源片段克隆后，构建百脉根特异的叶绿体转化载体；构建的百脉根叶绿体定点转化载体pAKE2以扩增的1.35 kb psbA 和1.5 kb trnK两段相邻叶绿体 DNA为定点整合外源基因的同源重组片段，包含以叶绿体基因特异强启动子Prrn和终止子TpsbA为调控序列的E2基因表达盒和aadA壮观霉素抗性基因表达盒。【结论】经PCR和酶切验证，所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。     

半夏愈伤组织诱导优化研究

为快速诱导形成适合悬浮培养的半夏愈伤组织,对半夏愈伤诱导培养基采取了优化组合。在MS+1.0mg·L-16-BA+2.0mg·L-1NAA培养基上能诱导形成浓绿、致密的愈伤组织;在MS+0.5mg·L-16-BA+2.0mg·L-12,4-D的培养基上,可诱导形成疏松的黄白色愈伤组织,但生长缓慢。将前者后期继代培养基配方调整为MS+0.5mg·L-16-BA+2.0mg·L-12,4-D,可较快诱导出疏松的黄白色愈伤组织,适合做悬浮培养。     

50%YRC2388 WP防除水直播稻田杂草效果评价

对50%YRC2388WP新型水稻田除草剂的防除效果进行了研究。结果表明,播后6d用75～150g/hm2YRC2388WP处理,对稗草和千金子的防效分别为90.2%～100%和100%,播后9d用125～300g/hm2处理,对稗草和千金子的防效分别为91.5%～100%和99.1%～100%;播后9,12d用药,对水稻基本苗基本无影响;从考种结果看50%YRC2388WP播后6,9,12d用药的各处理,理论产量均有较大的提高。     

油菜蛭石培营养液配方的筛选

选用3种不同的营养液配方对油菜进行蛭石培试验。结果表明:绿叶菜通用配方是最适宜进行油菜蛭石培的营养液配方。采用该配方进行处理后,油菜的产量、叶绿素含量较高,根系活力居中,硝酸盐含量最低,比古典水培配方处理降低了11.11%,比自制营养液配方处理降低了13.08%。     

菠菜离体叶绿体培养研究

研究了不同pH值、温度、光照、悬浮介质对菠菜离体叶绿体存活时间的影响,结果表明,在pH为7.6、温度为5℃(低温)的黑暗条件下用悬浮介质Ⅰ培养的菠菜离体叶绿体活性保持时间较长。     

三叶青毛状根的诱导及其液体培养体系的研究

为建立三叶青毛状根的诱导和液体培养体系,采用发根农杆菌株系C58C1和ATCC15834进行毛状根的诱导,通过无菌三叶青叶片预培养、浸染、共培养、筛选、形态和PCR鉴定等过程获得三叶青毛状根根系,并对三叶青毛状根和两年生块根总黄酮进行比较分析。试验结果表明,发根农杆菌C58C1能从三叶青叶片诱导出毛状根,三叶青毛状根在不添加生长素的1/2MS液体培养基中生长状态良好,其总黄酮含量约是2年生三叶青块根的1/5。     

番茄下胚轴和子叶离体诱导成株的激素调控

以番茄幼苗的下胚轴和子叶为外植体,研究不同激素培养基对其不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,诱导不定芽的最适培养基为MS＋6-BA（2.0 mg/L）＋IAA（0.3 mg/L）,该培养基中下胚轴的不定芽诱导率为73.3%,子叶的不定芽诱导率为53.2%;低浓度IBA和IAA配合使用的生根效果好于单独使用IBA。