6种酶联免疫试剂盒在饲料呕吐毒素检测中的准确性评价

为评估市售各品牌霉菌毒素酶联免疫检测试剂盒在饲料及其原料呕吐毒素检测中的准确性,特选购市售6种品牌试剂盒进行验证,并选定其中一种试剂盒与高效液相色谱法检测结果进行比较。试验结果表明,市售6种品牌试剂盒检测结果存在极大差异;与高效液相色谱法相比,试剂盒检测结果偏高,且相对平均偏差最高为48.4%。因此,选择市售酶联免疫试剂盒进行呕吐毒素含量检测使用前,有必要进行准确性验证,以保证检测结果的准确性,降低饲料安全评估风险,且ELISA检测结果显示为阳性的样品,需结合高效液相色谱法进一步确认,以防误判。     

质量控制图在水产饲料氨基酸分析中的应用

通过对实验室自制标准物料-豆粕样品中氨基酸含量的多次测定,建立X-S质量控制图,开展水产饲料氨基酸分析日常质量控制。试验按照GB/T 18246-2000,通过微波水解-离子交换-柱后衍生-紫外检测法对豆粕样品氨基酸含量进行连续测定,并以FAPAS奶粉标准物质验证,利用偏度-峰度检验法对离群值进行判断,建立赖氨酸、甘氨酸、氨基酸总量质量控制图。结果显示,质量控制图中豆粕质控样赖氨酸、甘氨酸、氨基酸总量测定的RSD值均小于4%,FAPAS奶粉标准物质测定值落在参考范围内,建立的质量控制图能对日常氨基酸检测结果进行有效监控。结果表明,所建立氨基酸质量控制图直观有效,能对过程存在的异常因素起到预警作用,并可节约成本。     

近红外光谱法检测玉米蛋白粉中17种氨基酸含量

<正>为准确评价玉米蛋白粉的质量情况,传统的粗蛋白检测已无法满足饲料企业的需要,目前玉米蛋白粉的氨基酸检测已越来越重要。而大批量的经典化学方法检测不仅检测周期长,而且检测费用高,因此,大型饲料企业迫切的需要一种快速及准确的氨基酸检测方法。     

超高效液相色谱-串联质谱快速测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定水产品中孔雀石绿（MG）、结晶紫（CV）及其代谢物隐色孔雀石绿（LMG）和隐色结晶紫（LCV）残留量的快速、准确检测方法。该法在SN/T1768-2006快速检测方法的基础上,采用空白样品添加不同质量浓度标准溶液的方式绘制校准曲线,并以氘代孔雀石绿（D5-MG）和氘代隐色孔雀石绿（D6-LMG）为内标进行检测,从而大大提高了定量的准确性。结果表明,MG、CV、LMG和LCV4种待测物在0～10.0ng·mL^-1范围内线性关系良好（R〉0.99）,方法检出限均为0.1μg·kg^-1。在加标量为0.5和1.0μg.kg-1水平下4种待测物平均回收率在92.1%～111.0%之间,测定结果的相对标准偏差为2.2%～9.5%。此外,该法在FAPAS国际能力验证中得以证实,改进后的方法快速且准确,能满足水产品出口检测要求。     

黄鳍鲷骨骼肌伴肌动蛋白的纯化及其抗体制备

采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体.多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG).采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况.SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Western-blot检测表明兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体能与肌原纤维蛋白中的伴肌动蛋白发生特异性反应,而与其它蛋白不发生免疫交叉反应.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中的喹烯酮

本研究采用超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中喹烯酮的残留量。样品经乙腈-乙酸乙酯（1:1,V/V提取、正己烷除脂净化后，用乙腈-0.2%甲酸作为流动相，经C18分离、LC-MS/MS多反应监测、正离子模式分析，基质匹配外标法定量。结果表明：在浓度为1.035～103.5 ng/mL，四种饲料喹烯酮基质匹配标准工作曲线线性关系良好，相关系数均在0.998以上；方法检出限为6.0μg/kg、定量限为20.0μg/kg，方法加标回收率为89.6%～116.0%、相对标准偏差为3.44%～7.19%，适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中喹烯酮残留量的检测。     

冷藏条件下鲢鱼肌肉蛋白的变化

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法分析比较了鲢鱼在0和4℃下冷藏14 d过程中肌肉蛋白的变化情况.结果表明:在2种温度下冷藏,肌浆蛋白降解均不显著,其变化趋势基本一致;肌球蛋白重链在0℃下冷藏14 d,4℃下冷藏11 d后发生明显降解;α-辅肌动蛋白和肌动蛋白在2种温度下冷藏均呈逐渐降解的趋势,且在4℃下冷藏降解更为显著;原肌球蛋白在0和4℃下冷藏2 d后均开始降解,此后于0℃冷藏蛋白无明显变化,但于4℃冷藏11 d后降解速度加快.     

饲料及其原料中沙门氏菌的分离鉴定和耐药分析

为了解饲料及其原料中沙门氏菌污染情况及耐药情况,为沙门氏菌病的防控工作提供理论依据,特针对饲料及其原料开展沙门氏菌污染情况及耐药情况筛查。试验共收集饲料及原料样品707份,参照GB/T 13091－2002饲料中沙门氏菌检测方法进行沙门氏菌的分离和鉴定;分离株以API 2.0E鉴定试剂盒确认;后参照GB 4789.4－2010进行血清分型,并采用K-B纸片琼脂扩散法测定分离株耐药情况。结果表明,共检出阳性样品56份,阳性率为7.9%,其中52份为动物性原料;经血清分型得到阿贡纳沙门氏菌（Agona）5株,阿贡纳沙门氏菌Ⅱ（AgonaⅡ）1株,博内茅斯（Bournemouth）1株和摩科拉（Mokola）1株,其余菌株因血清种类有限,仅分型至群,未能进一步分型;药敏试验结果显示,饲料中沙门氏菌耐药率比人源和动物源性沙门氏菌低,但仍分离到13重耐药株1株,4重耐药株2株,3重耐药株9株,2重耐药株12株,且各菌株耐药谱不同。饲料及其原料中沙门氏菌检出率和耐药性相对较低,但仍存在个别菌株耐药情况严重的现象,有必要继续加大、加强针对抗生素使用的监管力度。