禽流感等病毒病的综合控制方案

1消弱病原体的进攻力加强饲养管理,处理好保温和通风的关系。加强消毒,减少病原体的数量降低其毒力。具体消毒程序见表1。减少应激。早春气温低,鸡很容易受到冷的应激,在保持通好风的前提下还要保好温,多加炉子,提高鸡舍内的温度,扩群、转群时应在饮水中加电解多维,换料时应逐渐过渡。控制其他疾病的发生。控制不发病毒病,改善免疫和免疫保健外,必须控制不发慢性呼吸道病和肠炎,上述两种疾病一旦发生病毒会长驱直入。药物控制,按程序用药,具体药物预防和保健程序见表2。2提高机体的抵抗力2.1保持机体皮肤和粘膜系统的完整从以下方面着手:①…     

棉花根系和叶片质外体汁液分离方法的改进

质外体汁液(apoplastic washing fluid, AWF)在植物生长发育和抵抗生物及非生物逆境方面发挥着重要作用。目前普遍采用真空渗透离心法提取质外体汁液,但具体提取流程和条件却因植物培养条件、种类和器官等不同而不同。本试验以营养液培养的棉花幼苗为材料,改进了棉花根系和叶片AWF分离的取样方法、渗透条件和离心参数等。结果表明,相对于通常的非整体取样,改良后整体取样简单易操作且显著降低了质外体与共质体的苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase, MDH)活性比值,更适宜开展质外体汁液组分研究。根据真空渗透鲜重增加和AWF稀释因子,进一步证明根系不用真空渗透;而叶片需真空渗透,适宜真空强度/时间为-60 kPa/1min,真空后恢复到正常压强约110s。证明叶片颜色变深面积可作为判定真空渗透强度或时间是否适宜的一种简易可行方法。最后,AWF体积、质外体与共质体的可溶性蛋白含量比值和MDH活性比值综合分析表明,棉花根系适宜离心力大小/时间长度为800×g/10～20 min,叶片为400×g/5 min。本改进方法为棉花AWF组分,如蛋白质组学和代谢组学等研究结果的准确性和可靠性奠定了基础,为其他作物AWF分离方法的优化提供了参考。     

重组Gallinacin-3的克隆及在大肠杆菌中的表达

防御素是昆虫、植物和动物体内抗感染及激发特异性抗感染免疫的重要抗菌肽。Gallinacin-3（gal-3）可能是鸡体内最重要的β-防御素，但它的功能还未得到研究证实。本试验从鸡黏膜表皮组织中克隆了gal-3编码基因，并在大肠杆菌中成功表达了gal-3与谷胱甘肽转硫酶（GST）融合蛋白。经IPTG诱导后，融合蛋白的产量占细菌总蛋白的33．6％左右，主要以包涵体形式存在。用亲合层析技术从大肠杆菌裂解液中纯化出可溶性重组蛋白，并用酶切除目标蛋白的融合伴侣。抑菌试验发现，重组gal-3-GST融合蛋白在未去除融合伴侣时，就与游离的gal-3有着相同的抑菌活性，对沙门氏肠炎杆菌和志贺氏痢疾杆菌的最小杀菌浓度在20μg／mL（相当于约4μg／mL纯gal-3）左右，与其他物种β-防御素的活性相当。     

鸡β-防御素在大肠杆菌中的高效表达及复性

鸡β-防御素(gallinacin-3,Gal3)是鸡体内重要的防御因子,本试验研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高效表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.结果表明,加入诱导剂后1h,开始有可检出量的重组蛋白质表达,2h的表达水平已接近最大量;化学诱导剂IPTG 0.2～1.2mol/L对重组蛋白的产量没有明显影响.经Lablmage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35%以上,且主要以包涵体形式存在.将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性.12mg/L复性的重组鸡Gal3能抑制肠炎沙门氏菌的生长,24mg/L能抑制肠致病型大肠杆菌的生长.     

蛋鸡α-干扰素基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与复性研究

根据GenBank中鸡IFN—α序列设计引物对，利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡（SPY）的IFN-α基因，命名ChIFN-S1，与GenBank中IFN-α比较，ORF长度均为582个核苷酸，其成熟肽包含162个氨基酸，相互间同源性在98．8％-99．8％。将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后，通过ITPG诱导，收集菌体高压破碎后提取包涵体并进行初步纯化，利用胱氨酸．半胱氨酸再氧化还原法对纯化后的变性液进行分段稀释法复性。细胞病变抑制法（CEF-VSV为检测系统）测定复性液的抗病毒比活性高达10^9U／mg以上．     

变温条件下钙对山定子叶片氮代谢的影响

以当年生山定子实生苗为试材,研究变温(5℃→20℃→10℃→0℃)条件下添加钙盐(2%CaCl_2和1%CaAc_2)和钙抑制剂(20mmol·L~(-1)EGTA和0.1 mg·L~(-1)LaCl_3)对山定子叶片氮代谢关键酶活性和可溶性蛋白含量变化的影响。结果表明,变温处理导致硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性先降低后升高,谷氨酸合酶(GOGAT)活性呈降低趋势,可溶性蛋白含量变化较平缓。添加钙盐处理不同程度上提高了氮代谢关键酶酶活性和可溶性蛋白含量,其中有机钙处理的效果更显著。两种钙抑制剂EGTA和LaCl_3处理的效果有所不同,其中EGTA处理的NR和GS活性在升温阶段低于对照,在降温阶段高于对照,对GOGAT活性一直起抑制作用,且降低了可溶性蛋白含量。而LaCl_3处理能够不同程度诱导各酶活性的表达,并且能够提高可溶性蛋白含量。本研究的结果对冷凉地区苹果钙素营养管理提供了理论参考。     

左旋咪唑对鸡传染性法氏囊病疫苗免疫效果影响的观察

为观察左旋咪唑对鸡传染性法氏囊病疫苗免疫效果的影响，进行2个实验：试验1，饮水给予10mg/kg.d左旋咪唑，连用3d，然后进行鸡传染性法氏囊病疫苗初次免疫，免疫后14－21d，鸡血清抗IBDV抗体滴度明显降低；试验2，鸡在初次免疫后35d进行第2次免疫，且在2次免疫前先应用10mg/kg.d左旋咪唑，连用3d，免疫后鸡血清抗IBDV抗体滴度无明显变化。     

促卵散提高老龄鸡产蛋率的试验

针对开发新产品的需要,我们设计了蛋鸡饲料添加剂——促卵散,并进行了现场评价试验,取得了预期效果,现将结果报告如下。材料和方法实验动物:山东省海阳县饲料公司养殖场京白Ⅲ系产蛋鸡,510日龄。动物分组:本试验分为三个组,每组185只鸡。一组为对照组,只喂基础日粮;二组为促卵散一号组,基础日粮中添加1%用量的促卵散一号;三组为促卵散二号组,基础日粮中添加1%用量的促卵散二号。