双组分调控系统介导革兰阴性菌耐药的作用机制

菌群耐药已成为临床上亟待解决的关键问题,特别是革兰阴性菌引起的耐药现象尤为突出,给临床治疗带来了巨大的挑战,尽快阐明重要细菌复杂耐药表型的调控机制就显得尤为重要。双组分调控系统(two-component regulatory systems,TCS)存在于多种革兰阴性菌中,在细菌诸多生命活动中发挥关键作用,是细菌感知环境变化并产生相应调控的主要机制之一。TCS通常由两种蛋白组成,包括感受器蛋白(通常是组氨酸激酶)和反应调节蛋白(通常是转录因子),二者可通过磷酸化介导的协同作用,整合细菌周围的环境信号、调节细菌相关的基因表达及改变细菌的某些生理行为。近年来,探索细菌TCS介导的耐药性应答机制已成为一个新的研究热点。基于此,本文从TCS介导临床重要革兰阴性菌耐药的结构基础和作用机理等方面进行综述,以期增进对细菌TCS的全面认识,为今后临床上药物的科学研发提供新的思路和对策。     

长吻鮠营养需求研究综述

长吻鮠俗称鮰鱼、鮠鱼、江团、肥坨,属鲶形目、鲿科、鮠属,分布于我国的辽河、淮河,长江、闽江至珠江等水系及朝鲜西部,是我国重要的经济鱼类.长吻鮠对生态环境的适应性较强,经过人工驯化可在湖泊、池塘中饲养.近年来,长吻鮠的人工养殖已经在我国湖北、四川、重庆、广东和安徽等省市迅速兴起,对人工配合饲料的需要量也不断增加.制定合理的长吻鮠饲料配方,生产质高价廉的配合饲料,是当前长吻鮠产业发展的重要任务,因此,开展长吻鮠的营养需求研究工作十分必要.     

长吻鮠的营养需求

长吻鮠（Leiocassis longirostris Gunther）俗称鮰鱼、鮠鱼、江团、肥坨，属辐鳍鱼纲鲶形目鲿科鮠属，分布于中国东部的辽河、淮河、长江、闽江至珠江等水系及朝鲜西部，以长江水系为主，是我国重要的经济鱼类。长吻鮠肉质细嫩鲜美，营养丰富，历来被视为鱼中珍品，特别是它那硕大厚实的鳔制成的“鱼肚”，更是享誉海内外。但目前野生资源缺乏，市场供不应求。长吻鮠对生态环境的适应性较强。经过人工驯化的种类可在湖泊、池塘中饲养。近年来，长吻鮠的人工养殖已经在我国湖北、四川、重庆、广东和安徽等省市迅速兴起，对人工配合饲料的需要量也不断增加，为了制定出合理的人工饲料配方，从而生产出质高价廉的配合饲料以满足养殖之需，因此开展长吻觥的营养需要求研究工作十分必要。     

鸭疫里默氏杆菌MFS外排泵rant基因缺失株的构建及其介导的耐药性

旨在构建鸭疫里默氏杆菌rant基因缺失株及回复株,明确MFS外排泵Rant对鸭疫里默氏杆菌耐药性的影响。本研究以鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株为研究对象,通过自杀质粒pRE112介导的同源重组,以红霉素抗性标记进行正向筛选,获得基因缺失株Δrant,并以大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭质粒pCPRA作为载体,构建回复株cΔrant。采用微量肉汤稀释法测定11类临床常用抗生素对野生株、缺失株及回复株的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,并测定3株菌的生长曲线,评价菌株对雏鸭的致病能力。结果表明,与野生株和回复株相比,四环素类抗生素对缺失株的MIC值明显下降,其他类抗生素的MIC值无变化;缺失株的生长速率明显下降;rant基因的缺失显著降低鸭疫里默氏杆菌的毒力。结果提示,鸭疫里默氏杆菌rant基因介导四环素类抗生素的外排,并可明显影响鸭疫里默氏杆菌的生长和毒力。     

鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株GE296_RS01450基因介导其对重金属离子产生耐受性的分析

本研究旨在阐明鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株GE296_RS01450基因介导其对重金属离子产生耐受性的作用。构建RA-LZ01株的GE296_RS01450基因缺失株Δ1450和回复株cΔ1450,测定菌株的生长曲线、抗菌素对菌株的最小抑菌浓度（MIC）、菌株对重金属离子的耐受程度以及GE296_RS01450基因在特异性重金属离子刺激下的转录水平。结果显示,与亲本株相比,缺失株的生长能力以及11类抗菌素对缺失株的MIC值均无明显变化;与亲本株和回复株相比,缺失株对重金属离子Ni、Mn和Co的敏感性显著上升,并且在Ni、Mn刺激下,GE296_RS01450基因的转录水平显著上调。上述结果表明,GE296_RS01450基因不参与亲本株的生长及菌株对抗菌素的耐药性,可介导菌株对Ni、Mn和Co产生耐受性。GE296_RS01450基因属于GE296_RS01445-GE296_RS01450-GE296_RS01455 RND外排泵,编码外膜蛋白,我们将其命名为RopM。     

牛支原体能量耦合因子转运蛋白S组件MbBioY摄取外源生物素的功能分析

牛支原体(M.bovis)感染与生存依赖于外界微环境提供的各类营养代谢因子。开展M.bovis外源生物素摄取的机制研究,将对M.bovis防控具有极其重要的意义。通过对M.bovis PG45 MbBioY(MBOVPG45＿0349)基因进行系统发育分析、分子对接分析,筛选M.bovis PG45 MbBioY突变株,比较PG45和PG45ΔMbBioY的生物素敏感性,异源构建MbBioY功能性克隆验证其功能。结果表明,PG45染色体上存在一种崭新的生物素膜转运蛋白,全长996 bp, GC含量30.95%,蛋白长度为332个氨基酸,是由7个跨膜结构域组成的能量偶合因子(ECF)转运蛋白S成分MbBioY。进一步验证后发现,当M.bovis缺失MbBioY会影响其生长,表现出生物素代谢营养缺陷的表型。通过异源敲入生物素代谢营养缺陷大肠杆菌MG1655,表明MbBioY单独存在时,就能够恢复生物素代谢营养缺陷大肠杆菌缺失株的生理功能。初步证明,MbBioY编码的是能量偶合因子(ECF)转运蛋白的S成分具有摄取外源生物素的能力,该研究结果将补充细菌生物素代谢调控的多样性和复杂性,为M.b...     

铁的生物学功能及其在水产上的研究

铁是水产动物必需的微量元素之一,铁能够影响水产动物机体的能量代谢、营养代谢、蛋白质合成、免疫机能、生长发育等各种生理活动缺铁会引起水产动物出现贫血、缺氧等症状;铁过量会引起水产动物中毒.从铁的生物学功能、水产动物饲料中铁的最适含量、铁不足或过量时对水产动物的影响、铁对水产动物生理机能的影响等方面进行综述.