华山松SSR-PCR反应体系优化

[目的]建立华山松SSR-PCR最佳反应体系,为华山松种质资源的分子标记辅助育种、遗传多样性分析及遗传图谱构建研究提供理论参考.[方法]以华山松幼嫩针叶为材料,分别采用试剂盒法、SDS法和改良CTAB法提取华山松基因组DNA,确定华山松DNA最佳的提取方法.通过L16(44)正交试验设计对华山松SSR-PCR反应体系中引物用量(A)、dNTP用量(B)、Taq DNA聚合酶用量(C)和DNA模板用量(D)进行优化,获得华山松SSR-PCR最佳反应体系.[结果]改良CTAB法提取的基因组DNA浓度为92.1~1786.3 ng/μL,OD260/OD280为1.80~2.07,OD260/OD230比值约2.0,条带明亮且清晰,无弥散现象,表明该方法提取效果最佳.正交试验极差分析结果显示,4个因素影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为A>D>B>C,最优水平组合为A4B2C2D2.正交试验方差分析结果显示,4个因素影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为A>D>C>B,最优水平组合为A4D2C2B2.结合正交试验16个组合的评分结果,最终确定华山松SSR-PCR最佳反应体系(20.00μL):10μmol/L引物0.35μL,50 ng/μL DNA模板1.00μL,10 mmol/L dNTP 2.00μL,5 U/μL Taq DNA聚合酶1.20μL,10×PCR Buffer(含Mg2+15 mmol/L)2.00μL,用ddH2O补足至20.00μL.[结论]优化获得的华山松SSR-PCR最佳反应体系可应用于华山松种质资源评价及分子标记辅助育种等研究.     

抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备

为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZENBSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10。3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链。制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上。该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应。所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测。     

浅谈教育的外部性及其矫正

福利经济学自出现以来,就一直关注外部性研究.人们在进行经济决策时也开始考虑外部性的影响,教育领域同样挡不住经济学领域中外部性的强势渗透.教育的外部性会导致教育的福利损失,出于对经济的理性思考,对教育的外部性进行矫正有利于资源的有效配置,提高全社会的福利水平.     

饲料市场经销商危机研究

中国饲料工业已经历了20多年的高速发展，到2005年，饲料工业总量1．07亿t，产值达到2742亿元，仅次于美国位居世界第2位，创造了世界饲料发展史上的奇迹，饲料工业已成为中国发展最快的行业之一。随着饲料工业的蓬勃发展．一大批优秀的饲料经销商也脱颖而出，拥有百万家产的已比比皆是，千万富翁也屡见不鲜，他们在为自己创造财富的同时，也为国家和社会作出了很大贡献。[第一段]     

实验用兔的取血方法

家兔作为一种实验动物,已广泛地应用于生物学、药学、医学、免疫学等研究中.而兔血是进行上述实验研究必不可少的实验材料.通过检测血液中的各项生化指标、免疫学以及遗传学指标,可较全面地了解家兔的生理生化特性,为实验研究提供第一手资料.同时在利用家兔制备抗体时,更需要大量的兔血分离血清.因此,采血技术的好坏直接影响实验结果优劣.笔者结合自己多年的工作经验,对几种常用的兔采血方法以及适用范围加以介绍,为实验人员提供参考.     

饲料市场的“期前营销”策略

中国饲料工业，是随着中国改革开放应运而生的新兴产业，在短短二十多年的时间内，取得了突破性的发展，整体水平与国际水平的差距已大大缩小，部分领域已接近甚至达到国际先进水平。2005年，中国饲料总产量首次突破亿万吨大关，达到1．03亿万吨，仅次于美国居世界第二位。随着中国饲料工业的蓬勃发展，未来的市场将更严峻，竞争将更激烈，利润率愈来愈低，饲料企业如何能做好市场营销工作，     

复方丹参片不同干燥工艺的UPLC特征图谱及指标性成分含量

为优选适宜复方丹参片的干燥方法,探索微波真空干燥、真空干燥和烘箱干燥3种干燥工艺对丹参提取液的影响,采用UPLC法测定不同干燥方法的丹参提取液的UPLC特征图谱及指标性成分含量。结果表明:迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA浓度分别在0.007~0.026 mg/mL,0.130~0.440mg/mL,0.002~0.009mg/mL,0.003~0.015mg/mL的线性关系良好(r≥0.999 1),平均回收率分别为99.30%(RSD=0.62%),96.41%(RSD=0.47%),100.58%(RSD=1.23%),102.84%(RSD=1.02%)。微波真空干燥、真空干燥和烘箱干燥后的指标性成分总含量分别为64.780 5 mg/g、64.501 7mg/g和58.990 0mg/g。3种干燥方法的UPLC特征图谱相似度达0.997以上。综合考虑微波真空干燥明显优于其他干燥方法。     

增强苗木质量四环节

影响造林成活的因素很多,苗木质量是关键因素之一。因此,要想保证造林成活率,就必须保证苗木质量,就必须加强苗木管理。一、成苗出圃前的管理苗木在苗圃起苗后,应选择背风、避荫处、并立即进行选苗分级工作。严禁在大风天,光照强烈时起苗。选苗应选择干形良好、顶芽饱满、色泽正常、根系发达的苗木,严格按规程规定的苗木等级标准进行分级,按规定数量打捆,假植,或放入苗木窖中浇水,以保     

增强苗木质量四环节

1.成苗出圃前的管理。苗木在苗圃起苗后,应选择背风、背阴处,并立即进行选苗分级,严禁在大风天、光照强烈时起苗。选苗应选择干形良好、顶芽饱满、色泽正常、根系发达的苗木,严格按规程规定的苗木等级标准进行分级,按规定数量打捆假植,或放入苗木窖中浇水,以保证苗木活力。2.苗木调运。调运苗木的车辆,必须配     

雌性光倒刺鲃性腺成熟度的外部感观鉴别

光倒刺鱼巴 (SpinibarbushollandiOshima)原为江河野生鱼类 ,自上世纪九十年代我所突破人工繁殖技术以来 ,改变了过去仅靠捕捞江河野生苗种养殖的局面。随着光倒刺鱼巴养殖的发展以及江河光倒刺鱼巴资源的日益枯竭 ,养殖苗种的来源将越来越依赖于人工繁殖。由于光倒刺鱼巴繁殖生物学、形态学及解剖学方面的特殊性 ,制约其人工繁育大规模的生产。近年 ,我们就其性腺成熟度外部感观特征与繁殖效果的关系进行了实验性的探讨 ,以求有效的指导生产 ,提高人工繁殖过程中亲鱼成熟度鉴别的准确性。1　性腺成熟度外观鉴别目前对淡水鱼类 (“家鱼”)…